The role of the global regulators SarA ob in Staphylococcus aureus biofilm formation

• Autores: Jaione Valle Turrillas
• Directores de la Tesis: Iñigo Lasa Uzcudun (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Pública de Navarra ( España ) en 2004
• Idioma: inglés
• Tribunal Calificador de la Tesis: Beatriz Amorena Zabalza (presid.), José Ramón Penadés (secret.), Antonio Gerardo Pisabarro de Lucas (voc.), Carlos Martín Montañés (voc.), José Berenguer Carlos (voc.)
• Texto completo no disponible (Saber más ...)
• Resumen

  • Staphylococcus aureus es una de las bacterias que con frecuencia causa infecciones asociadas al uso de implantes en el ámbito hospitalario. La bacteria es capaz de adherirse a la superficie del implante y formar comunidades de microorganismos que crecen embebidos en una matriz de exopolisacáridos denominada comúnmente "Biofilm". Dentro del biofilm la bacteria es más resistente a los tratamientos antibióticos y a la acción del sistema inmune.

    Como consecuencia, las infecciones asociadas a biofilms bacterianos sólo se resuelven con la sustitución del implante contaminado. El desarrollo de nuevos fármacos que o bien eviten la formación del biofilm o desestabilicen un biofilm ya formado requiere la identificación de los genes esenciales implicados en el proceso de formación o mantenimiento del biofilm. Con este objetivo final en mente, iniciamos un proyecto de investigación dedicado al estudio genético del proceso de formación del biofilm por S. aureus.

    Para llevar a cabo este trabajo necesitábamos seleccionar un aislado clínico de S. aureus que fuese manipulable genéticamente y con una fuerte capacidad de producir biofilm in vitro y por otro lado establecer la metodología y las condiciones óptimas de formación del biofilm en el laboratorio. Para ello analizamos la capacidad de formación del biofilm de 63 aislados clínicos de S. aureus utilizando cinco ensayos diferentes. En base a los resultados obtenidos seleccionamos el aislado clínico 15981 como bacteria modelo para el estudio de la formación del biofilm y desarrollamos la metodología de análisis del biofilm en condiciones de laboratorio. Utilizamos la técnica de mutagénesis por transposición para identificar mutantes deficientes en la formación del biofilm en un ensayo sobre placas microtiter. Sorprendentemente, de los 10.000 mutantes analizados, sólo tres mutantes perdían la capacidad de formar biofilm en las distintas condiciones utilizadas. De los tres m