Resumen de Desarrollo, validación y aplicación de métodos de análisis de especies de mercurio y biomarcadores con un enfoque ecotoxicológico
DESARROLLO, VALIDACIÓN Y APLICACIÓN DE MÉTODOS DE ANÁLISIS DE ESPECIES DE MERCURIO Y BIOMARCARDORES CON UN ENFOQUE ECOTOXICOLÓGICO El mercurio es un elemento no esencial cuya biodisponibilidad y efectos tóxicos varían en función de su especiación. Así, las formas orgánicas presentan una neurotoxicidad más elevada que el mercurio inorgánico y una mayor capacidad de bioacumulación y biomagnificación habiendo resultado en una legislación específica que regula los niveles de mercurio en alimentos de origen marino. Sin embargo, a pesar de la importancia de la problemática del mercurio todavía son muchas las cuestiones que quedan abiertas. Estas cuestiones abarcan desde la propia etapa de análisis hasta su comportamiento en el medio ambiente y sus efectos tóxicos. Por tanto, la presente Tesis doctoral pretende contribuir al conocimiento sobre el mercurio tanto en la vertiente analítica como en el estudio de su comportamiento y efectos en el medio ambiente, más concretamente en el ecosistema terrestre.
El análisis de especies de mercurio en muestras de interés clínico como la sangre es cada vez más aceptado en estudios con fines nutricionales y/o toxicológicos pero apenas existen métodos que permitan realizar este control. Por tanto, se ha desarrollado y validado un método rápido, sencillo y fiable que permite la determinación simultánea de metilmercurio, etilmercurio y mercurio inorgánico en sangre utilizando la cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas con plasma de acoplamiento inductivo (GC-ICP-MS). El método desarrollado ha sido utilizado para la determinación de especies de mercurio en sangre tanto de seres humanos que habitan en la cuenca del Amazonas (Brasil) como de aves del Parque Nacional de Doñana expuestas al vertido tóxico producido por el accidente minero de Aznalcóllar en 1998.
El comportamiento del mercurio en el medio ambiente es complejo y especialmente los mecanismos de acumulación y transformación en las cadenas tróficas terrestres apenas son conocidos. La segunda parte de la tesis está dedicada, por tanto, a estudios ecotoxicológicos en ambientes terrestres utilizando la lombriz de tierra como organismo bioindicador puesto que juegan un papel fundamental en el ambiente edáfico.
En estos estudios, además de conocer las concentraciones de las especies de mercurio, es importante obtener información sobre los efectos sub-letales provocados por este elemento. Por tanto, se ha desarrollado y validado un método que permite la determinación de glutatión, biomarcador de estrés oxidativo, en muestras biológicas utilizando como técnica analítica la cromatografía líquida de ultra-alta eficacia acoplada a la detección por fluorescencia molecular (UHPLC-FLD).
Se han realizado estudios ecotoxicológicos exponiendo la lombriz de tierra a diferentes suelos contaminados, tanto de forma natural como de forma artificial, y estudiando a distintos tiempos de incubación las especies de mercurio presentes tanto en lombriz como en suelo. Con el fin de estudiar mecanismos simultáneos de asimilación/excreción y metilación/demetilación, diferenciando el comportamiento del mercurio adicionado y del presente de forma natural, se han utilizado isótopos estables de mercurio enriquecidos lo que ha permitido obtener, por primera vez en este tipo de ensayos, esta importante información no disponible en ensayos toxicológicos clásicos sin isótopos marcados.
