Aportaciones moleculares y serológicas sobre la participación de Chlamydophila pneumoniae en la arteriosclerosis
- Autores: Fernando Fernández Sánchez
- Directores de la Tesis: Carmen Maroto Vela (dir. tes.), José Gutiérrez Fernández (codir. tes.)
- Lectura: En la Universidad de Granada ( España ) en 2002
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Gonzalo Piédrola Angulo (presid.), Eduardo Ros Díe (secret.), Almudena Rojas González (voc.), Manuel Casal Román (voc.), Estrella Martín Mazuelos (voc.)
- Materias:
- Texto completo no disponible (Saber más ...)
- Resumen
INTRODUCCIÓN Desde hace varios años se ha relacionado la infección por Chlamydophila pneumoniae (C.pneumoniae) con diversos procesos arterioscleróticos, utilizando para ello estudios serológicos y de detección directa.
OBJETIVOS Nuestro trabajo estudió la seroprevalencia de la infección y realizó pruebas de detección directa de la bacteria o su ADN sobre diversos grupos de población, intentando realizar aportaciones a esa posible relación.
MATERIAL Y MÉTODOS Los casos fueron 2 grupos de pacientes con enfermedad oclusiva de arterias periféricas: en uno se realizó PCR y ELISA de LPS sobre biopsia arterial (ATBS) y al otro PCR de células mononucleares de sangre periférica (CMSPs) y cultivo celular (ATCS). El tercer grupo era de pacientes con neumonía atípica (RES).
Los controles eran un grupo de controles patológicos no arterioscleróticos (VNAT), controles sanos del banco de sangre (CS) y pacientes con esclerosis múltiple (EM). Se realizaron 5 pruebas de serología a todos los grupos: para la prueba de MIF se diluyeron los sueros a 1/32, se usó como base antigénica CEs de C.pneumoniae purificados y un conjungado marcado con isotiocianato de fluoresceína. Los ELISAs utilizaron como antígenos proteínas purificadas de los CEs y LPS recombinante, respectivamente, y los sueros se diluyeron a 1/20 para la IgG y la IgA, y a 1/50 para la IgA y 1/100 para la IgG, en cada caso. Se realizó un ELISA de LPS sobre biopsia arterial, para lo que se extrajo el LPS con una solución enzimática y se usó en conjugado marcado con peroxidasa. Se efectuó una heminested PCR sobre biopsias arteriales, seleccionando regiones de 437 pb y 229 pb de la región PSt 1 con las parejas de primers HL-1/HR-1 y HM-1/HR-1.
Se usó un control interno de la beta-actina humana y la detección mediante electroforesis en gel de agarosa. En la PCR de CMSPs el control interno era de la interleucina 1-alfa humana. Para el cultivo celular se
