Resumen de Mecanismos de regulación de la transcripción de los 17B deshidrogenasas de esteroides humanas
Las 17¿deshidrogenasas de esteroides (17¿HSD) humanas son una familia de enzimas cuya actividad es esencial para la síntesis y metabolismo de esteroides sexuales en gónadas y tejidos periféricos, donde catalizan la interconversión de los 17cetoesteroides (inactivos) en 17hidroxiesteroides (activos). En este trabajo hemos analizado el papel de las cajas CCAAT, de los miembros de la familia C/EBP y de las hormonas sexuales en la regulación de la transcripción de las 17¿HSDs humanas. Con este fin, analizamos por métodos informáticos 500 pares de bases del extremo 5¿ de los genes de las 17¿HSDs de tipo 1 a 14 humanas y encontramos que, excepto en el caso del gen HSD17B1, todos ellos contienen cajas CCAAT y/o motivos de unión a C/EBPs (CCAAT enhancer binding proteins). Mediante experimentos de transfección transitoria mostramos que la elevación de los niveles intracelulares de C/EBP¿ induce la expresión de la 17¿HSD de tipo 11 en la línea celular de hepatocarcinoma humano HepG2, mientras que la de C/EBP¿ induce la de los tipos 8, 10 y 11. También mostramos que la región comprendida entre los nucleótidos 501 y +30 del gen HSD17B10 tiene actividad promotora en células HepG2 y que esta actividad puede inducirse con C/EBP¿ a través de una caja CCAAT presente en la posición 30/19 del gen. Mediante Western Blot y ChIP mostramos que las diferentes isoformas del factor de transcripción C/EBP¿ enlazan con dicha caja. Así, mientras que en células HepG2 en condiciones basales la isoforma LIP reprime la transcripción del gen, la expresión ectópica de la isoforma LAP suprime esta represión e induce la transcripción. Por otra parte, la transfección de plásmidos quiméricos de distinto tamaño del extremo 5¿ del gen HSD17B11 en células de carcinoma de próstata LNCaP y PC3, y en HepG2, mostró que dicho extremo tiene actividad promotora, siendo el fragmento comprendido entre 107 y +18 del gen suficiente para que se produzca su transcripción en los tres tipos celulares. Además, las cajas CCAAT y GC de las posiciones 71/84 y 51/65 son necesarias para la actividad completa del promotor en las líneas de próstata y son reconocidas por C/EBP¿ y Sp1 respectivamente. Finalmente, en este trabajo hemos demostrado que los estrógenos están implicados en su propia regulación mediante su acción sobre la expresión de la 17ßHSD de tipo 8, por interacción entre C/EBPß y el receptor de estrógenos alfa (ER¿), a través de su unión a las cajas CCAAT de las posiciones 5/16 y 46/55 del gen HSD17B8. Además, en células de carcinoma de mama MCF7, el tratamiento con E2 disminuye los niveles de expresión de la 17¿HSD de tipo 5 y aumenta los de la tipo 8 y junto a estos efectos, el tratamiento con E2 disminuye los niveles de expresión de las 17¿HSDs de tipo 4, 7 y 12 en células HepG2 transfectadas con un vector de expresión del ER¿. Los andrógenos por su parte, disminuyen la expresión de la 17¿HSD de tipo 5 en líneas celulares de carcinoma de próstata a través del receptor de andrógenos (AR) pero de manera independiente a los elementos de respuesta a andrógenos de las posiciones 898/881, 560/542 y 259/241 del extremo 5¿ del gen HSD17B5 con los que interacciona el receptor.
