Improving detection capabilities of doping agents by identification of new phase I and phase II metabolites by LC-MS/MS
- Autores: Cristina Gomez Castella
- Directores de la Tesis: Rosa Ventura Alemany (dir. tes.)
- Lectura: En la Universitat Pompeu Fabra ( España ) en 2014
- Idioma: español
- Tribunal Calificador de la Tesis: Rafael de la Torre Fornell (presid.), Victòria Sanz Nebot (secret.), Peter Hemmersbach (voc.)
- Materias:
- Enlaces
- Tesis en acceso abierto en: TDX e-Repositori UPF
- Resumen
Los estudios metabólicos de sustancias dopantes han sido tradicionalmente realizados mediante el uso de cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (GC-MS). En los últimos años, se ha demostrado la utilidad de la cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas (LC-MS) para realizar estudios de metabolismo. El objetivo de esta tesis fue estudiar el metabolismo (fase I y fase II) de diferentes sustancias dopantes mediante LC-MS/MS para mejorar la capacidad de detección de los compuestos estudiados.
Para mesocarb, compuesto termolábil, se detectaron en orina el compuesto inalterado y 19 metabolitos incluyendo metabolitos mono-, di- y tri-hidroxilados excretados libres o conjugados con ácido glucurónico y sulfato. Para toremifeno, un fármaco anti- estrogénico con espectro de masas de impacto electrónico con pocos iones diganóstico, se detectaron el compuesto inalterado y 20 metabolitos en orina. Se propuso la estructura de la mayor parte de metabolitos detectados.
Para mejorar la retrospectividad de la detección de los esteroides anabolizantes androgénicos (AAS) se estudiaron los metabolitos conjugados con sulfato. Se realizó un estudio de la hidrólisis y del comportamiento espectrométrico de los metabolitos conjugados con sulfato de AAS. Se estudiaron los metabolitos conjugados con sulfato de boldenona, metiltestosterona y metandienona. Se identificaron boldenona sulfato y epiboldenona sulfato como metabolitos de boldenona en humanos. Estos metabolitos pueden ser usados como marcadores de la administración exógena de boldenona. Para metiltestosterona, se detectaron y propusieron las estructuras de tres nuevos metabolitos conjugados con sulfato. Uno de ellos, el 17ß-metil-5¿ - androstan-3¿ ,17¿ -diol 3¿ - sulfato, fue detectado en orina hasta 21 días después de la administración de metiltestosterona. Se detectaron varios metabolitos de metandienona conjugados con sulfato no descritos previamente. Uno de ellos, identificado como 18-nor-17ß- hidroximetil-17¿ -metilandrost -1,4,13-eligen-3-ona conjugado con sulfato, fue detectado hasta 26 días después de la administración. Tanto para metiltestosterone como para metandienone, los metabolitos conjugados con sulfato permiten mejorar la retrospectividad de la detección respecto a otros marcadores descritos anteriormente.
Se ha demostrado la utilidad del LC-MS/MS para la detección y caracterización de metabolitos de sustancias dopantes, especialmente para el estudio de nuevos metabolitos de fase II y para estudios de metabolismo de compuestos que muestran limitaciones en GC-MS.
