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Resumen de Estudios de la relación estructura-función en DNA polimerasa DNA-dependiente del bacteriofago ø29

María Antonia Blasco Marhuenda

  • SE HAN CLONADO, PURIFICADO Y ESTUDIADO DOS MUTANTES TERMOSENSIBLES EN LA DNA POLIMETRASA DE 029 QUE FUERON AISLADOS "IN VIVO". ASIMISMO, SE HA CARACTERIZADO LA ACTIVIDAD DE PIROFOSFOROLISIS DE DICHA POLIMERASA DETERMINANDOSE SUS REQUISITOS ENZIMATICOS Y SU LOCALIZACION EN LA ESTRUCTURA TERCIARIA DE LA DNA POLIMERASA DEL BACTERIOFAGO 029. SE HA ESTUDIADO EL SIGNIFICADO FUNCIONAL DE TRES MOTIVOS AMINO ACIDICOS CONSERVADOS EN LA PARTE CARBOXILO-TERMINAL EN GRAN NUMERO DE POLIMERASAS, VIENDOSE QUE ESTABAN FORMANDO PARTE DEL SITIO ACTIVO DE ACTIVIDADES SINTETICAS (POLIMERIZACION E INRIACION) PERO NO DEL SITIO ACTIVO DE LA ACTIVIDAD EXONUCLEASA 3 '5' QUE SE LOCALIZARIA EN LA PARTE AMINO-TERMINAL DE LA ESTRUCTURA PRIMARIA DE LA DNA POLIMERASA DE 029. SE DETERMINARON RESIDUOS AMINOACIDICOS IMPLICADOS EN LA UNION DEL DNA MOLDE-PRIMER, DEL DNTPY DE LOS METALES. TODOS ESTOS ESTUDIOS HAN CONTRIBUIDO AL ESTABLECIMIENTO DE MODELOS ESTRUCTURA-FUNCION EN LA DNA POLIMERASA DE 029 Y POR EXTRAPOLACION DE OTRAS POLIMERASAS.


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