Resumen de Mecanismos de resistencia a quinolonas en cepas clinicas de acinetobacter baumannii
Se han estudiado los mecanismos de resistencia a quinolonas en 30 cepas clínicas de A.baumannii. La identificación bioquímica se realizó según el esquema de Bouvet y Grimont. Utilizando estos resultados las cepas se agruparon desde el punto de vista epidemiológico según el concepto de patrón de crecimiento. La relación epidemiológica también se estudio con las técnicas de REP-PCR t buotipia(Bouvet y Grimont). El agrupamiento de las cepas siguiendo el criterio de los patrones de creciiento presentó un poder de discriminación mayor que la biotipia. El método de REP-PCR fue el método más sensible, rápida y con mayor poder de discriminación.
El estudio de los mecanismos de resistencia se centró en el estudio de mutaciones en genes (gyrA,parC) que codifican topoisomerasas y en la detección de sistemas de expulsión activa de quinolonas al exterior celular.
Los métodos utilizados en el estudio de mutaciones fueron:RFLP-Hingl, SSCP y secuenciación. Todas las cepas resistentes a ciprofloxacino presentaron mutaciones en Ser83(GyrA). La sustitución más frecuente fue Ser83Leu, aunque se encontró una mutación no descrita antes de A.baumannii:Ser83Ala. Las cepas con un nivel de resistencia más alto presentaron una mutación adicional:Ser80Leu(ParC).Tanto RFLP-HinfI como SSCP son técnicas rápidas y fiables para la detección de mutaciones en estas posiciones, pudiendo SSCP diferenciar el tipo de sustitución.
La detección de sistemas de expulsión activa se realizó con técnicas de acumulación de antimicrobianos utilizando inhibidores metabólicos. No hubo relación directa entre la concentración intracelular de quinolona y el valor de CMI(concentración mínima inhibitoria), lo que apoya la idea de que el nivel de resistencia está determinado fundamentalmente por alteraciones de las topoisomerasas. En los aislamientos clínicos con mutaciones a nivel de gyrA y parC se comprobó la existencia de un sistema de elim
