Live analysis and function of Myc-mediated cell competition in mouse pluripotent stem cells
- Autores: Covadonga Díaz Díaz
- Directores de la Tesis: Miguel Torres Sánchez (dir. tes.)
- Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2017
- Idioma: inglés
- Tribunal Calificador de la Tesis: Ginés Morata (presid.), Miguel Manzanares Fourcade (secret.), Sergio Casas-Tinto (voc.), Manuel Serrano Marugán (voc.), Eduardo Moreno Lampaya (voc.)
- Materias:
- Enlaces
- Tesis en acceso abierto en: Biblos-e Archivo
- Resumen
Tanto en el embrión temprano de ratón como en cultivos de células madre embrionarias (CMEs), el factor de transcripción Myc muestra un patrón de expresión heterogéneo. Las células que expresan menos niveles de Myc son eliminadas de la población mediante competición celular. Se ha demostrado que Myc promueve la programación celular hacia un estado de pluripotencia y regula el anabolismo y la proliferación en CMEs; sin embargo, la función biológica de la competición celular endógena dependiente de Myc, así como la regulación y dinámica de la expresión este gen durante este proceso aún se desconocen.
En esta tesis desarrollamos una novedosa herramienta de análisis de imagen, a partir de la cual realizamos análisis de células individuales y sus vecindarios y generamos un sistema de datos 3D+t computarizados. De esta manera demostramos que, a pesar de que Myc se degrada y se vuelve a sintetizar rápidamente durante la mitosis, sus niveles de expresión son en su mayor parte heredables. Además, la competición celular se desencadena por interacciones aleatorias entre células con grandes diferencias en sus niveles de Myc; de forma que las células que poseen bajos niveles de Myc (“perdedoras”) integran en el tiempo contactos con células con mayor expresión (“ganadoras”) lo que lleva a una reducción progresiva en sus propios niveles hasta que mueren. Cabe resaltar que los niveles endógenos de Myc correlacionan con el estado de pluripotencia; las células en un estado más avanzado de diferenciación expresan menos Myc siendo eliminadas por células más indiferenciadas y con altos niveles de expresión. De hecho, la inhibición de la competición celular produce una acumulación de células en proceso de diferenciación. Estas observaciones correlacionan con resultados obtenidos en estudios realizados en epiblasto de ratón. Además, demostramos que la eficiencia competitiva viene directamente determinada por los niveles de Myc independientemente del estado de pluripotencia.
Estos resultados señalan a Myc como un intermediario entre el estado de diferenciación y la capacidad competitiva de las células pluripotentes. Por lo tanto, la competición celular endógena promovida por Myc funciona como un mecanismo de protección de pob0laciones de células madre pluripotentes frente a la diferenciación.
