Regulación del transportador neuronal de glicina GlyT2 por el receptor P2X3: Papel en dolor

• Autores: Lucía Villarejo López
• Directores de la Tesis: Beatriz López Corcuera (dir. tes.)
• Lectura: En la Universidad Autónoma de Madrid ( España ) en 2017
• Idioma: español
• Tribunal Calificador de la Tesis: Jorgina Satrústegui Gil-Delgado (presid.), Raquel Pérez Sen (secret.), Araceli del Arco Martínez (voc.), Ángel Luis Arévalo Martín (voc.), Miguel Ángel Íñiguez Peña (voc.)
• Materias:
  • Ciencias de la vida
    • Biología molecular
• Enlaces
  • Tesis en acceso abierto en: Biblos-e Archivo
• Resumen

  • La glicina desempeña un papel dual en el sistema nervioso central de vertebrados, actuando como neurotransmisor inhibidor y modulando la neurotransmisión excitadora al actuar como coagonista obligado del receptor de glutamato tipo NMDA. La neurotransmisión mediada por glicina finaliza cuando es retirada de la hendidura sináptica por los neurotransportadores de glicina (GlyTs) presentes en las membranas plasmáticas de la glía adyacente (GlyT1) y en los botones presinápticos de neuronas glicinérgicas (GlyT2). Un aspecto de gran interés es el estudio de los transportadores de glicina en vías nociceptivas, ya que la red de interneuronas glicinérgicas localizadas en las astas dorsales de la médula espinal regulan la transmisión de la señal dolorosa desde la periferia a regiones superiores del cerebro, controlando el equilibrio entre la señal excitadora mediada por interneuronas glutamatérgicas y la señal inhibidora. El desequilibrio de este balance está en la base de la patología del dolor crónico tanto de tipo inflamatorio como neuropático.

    En esta Tesis hemos ampliado el estudio de la regulación de GlyTs por receptores implicados en el procesamiento de la señal dolorosa en la médula espinal iniciado en el laboratorio mediante la demostración de que los receptores P2Y1 regulan de manera opuesta la actividad de GlyT1 y GlyT2. Esto contribuye al aumento de la función inhibidora y presumiblemente a los efectos anti-nociceptivos de este receptor. En este proyecto se estudia la regulación por otros receptores que en experimentos previos han demostrado capacidad de modulación de los GlyTs: receptores purinérgicos P2X3, cuya implicación en nocicepción en la médula espinal ha sido ampliamente demostrada. Para el estudio hemos utilizado cultivos primarios neuronales de médula espinal y células 1321N1 que poseen una mínima dotación basal de receptores purinérgicos. Hemos utilizado herramientas farmacológicas y de supresión génica con RNAi, medidas de microflurimetría de calcio intracelular y técnicas bioquímicas convencionales para analizar la actividad de GlyT2 mediante ensayo de transporte de 3[H]glicina y expresión en membrana mediante marcaje de superficie. Nuestros resultados indican que GlyT2 es activado por estimulación de receptores P2X2/3 y P2X3 y que el óxido nítrico está implicado en la señalización de P2X3 sobre GlyT2 favoreciendo su nitrosilación y aumentando su presencia en membrana tras su sobreexpresión. Se han explorado otras cascadas de señalización que interaccionan con la señalización de P2X3. Los estímulos pro-nociceptivos aumentan la actividad de GlyT2, lo que sugiere que la modulación del transportador tiene un papel destacado en el procesamiento de la señal nociceptiva.