Millora de soques i estudi d'estratègies de procés per a la producció de fuculosa-1-fosfat aldolasa
- Autores: Cristina Sans Duran
- Directores de la Tesis: Gregorio Alvaro Campos (dir. tes.), Josep López Santín (dir. tes.), Pau Ferrer Alegre (dir. tes.)
- Lectura: En la Universitat Autònoma de Barcelona ( España ) en 2011
- Idioma: catalán
- Tribunal Calificador de la Tesis: Francisco Valero Barranco (presid.), Josep Maria Serrat Jurado (secret.), Rosa María Ferraz Colomina (voc.)
- Materias:
- Enlaces
- Tesis en acceso abierto en: TESEO
- Resumen
La tesis doctoral se enmarca dentro de la Biotecnología Blanca, concretamente en el campo de la Producción de Proteínas Recombinantes. Las aplicaciones dentro de esta área de conocimiento de procesos industriales se basan en el diseño de microorganismos para obtener productos de alto valor añadido. En este caso, el microorganismo productor es Escherichia coli y la proteína de interés, Fuculosa-1-fosfato aldolasa, enzima que cataliza estereoselectivamente reacciones de adición aldólica.
Por una parte, se han llevado a cabo modificaciones a nivel de plásmido por tecnología de DNA recombinante, destinadas a mejorar un sistema de expresión auxotrófica para la glicina. Dichas mejoras no están dirigidas únicamente al incremento de la producción de la proteína de interés, sino a la obtención de un sistema de expresión seguro, simplificado y estable. La expresión de la proteína Fuculosa-1-fosfato aldolasa mediante cepas modificadas ha sido evaluada tanto a nivel de matraces de Erlenmeyer, como a nivel de fermentadores operando en discontinuo alimentado.
Por otra parte, se ha recurrido a una forma de expresión alternativa a la soluble: la expresión de la proteína de interés en forma de cuerpos de inclusión, lo cual ha permitido obtener altos niveles de Fuculosa-1-fosfato activa y pura. La aplicación de estos cuerpos de inclusión previamente inmovilizados por encapsulamiento mediante tecnología Lentikat® en una reacción estereoselectiva de adición aldólica ha dado lugar a un biocatalizador activo, robusto y estable a largo plazo.
Por lo tanto, este trabajo representa una pequeña aportación en la biotecnología industrial que intenta conceptualizar el proceso de manera holística, fusionando áreas de conocimiento distintas. Aunque no se ha realizado un análisis económico, consideraciones como la reutilización del biocatalizador han sido contempladas, con la finalidad de proponer un proceso atractivo industrialmente.
