Resumen de Funcionalidad de la unión de calmodulina a rac1: implicaciones en la endocitosis independiente de clatrina
Calmodulina (CaM), el principal sensor de calcio de la célula, interacciona y regula un amplio número de GTPasas pequeñas, incluyendo Rac1. En esta tesis describimos una interacción de alta afinidad entre Rac1 y CaM y descubrimos dos regiones nuevas y esenciales de Rac1: la región polibásica, importante para la interacción con su efector la fosfatidilinositol-4-fosfato-5-kinasa (PIP5K), y la prenilación.
La inhibición de calmodulina produce un incremento en la interacción entre Rac1 y PIP5K e induce la formación de una red de túbulos de membrana plasmática ricos en PI(4,5)P2. Por inmunofluorescencia hemos demostrado que estos túbulos son invaginaciones de la membrana que se corresponden con estructuras de la endocitosis independiente de clatrina y dependiente de Arf6. El papel de Rac1 en esta vía endocítica se analizó mediante la expresión de los mutantes constitutivamente activo y el inactivo. Mientras que el mutante activo de Rac1 impide la tubulación, el mutante inactiva favorece este efecto. De esta manera, la expresión del mutante inactivo facilita la tubulación gracias al reclutamiento de PIP5K y a la inactivación de Rac1 en la membrana plasmática. Además, la inhibición de CaM inactiva Rac1 e incrementa la interacción entre Rac1 y PIP5K. Así, nuestros resultados ponen de manifiesto un papel importante para Rac1 y CaM en el control de la endocitosis independiente de clatrina.
