Resumen de Síntesis, caracterización y estudios de hidrólisis de complejos trans-(ptci12(15n-amina')(15n-amina'))por rmn 2d (1h, 15n)hsqc. Citotoxicidad y fotoquímica de complejos de ptll y ptlv
Table of contents /Índice List of abbreviations and acronyms ......................... 13 Lista de abreviaturas y acrónimos........................... 15 Chapter 1...................................................... 17 1.1 General introduction ................................... 19 1.2 Objectives and outline................................. 37 1.3 Experimental, results and discussion ................. 41 1.3.1 Synthesis, characterization of trans-PtII and PtIV complexes and cytotoxicity studies in SF268, MCF-7 and NCI-H460 cancer cell lines .................................... 43 1.3.1.1 Introduction ...............................................45 1.3.1.2 Experimental ...............................................47 1.3.1.2.1 Materials ................................................................................ 47 1.3.1.2.2 Instrumentation ......................................................................... 47 1.3.1.2.3 Synthesis of cis-PtII complexes............................................................ 48 1.3.1.2.4 Synthesis of trans-PtII complexes ....................................................... 49 1.3.1.2.5 Synthesis of trans-PtIV complexes....................................................... 50 1.3.1.2.6 Structural determination by X-ray diffraction ............................... 52 1.3.1.2.7 Biological studies........................................................................................ 59 1.3.1.3 Results and discussion ....................................61 1.3.1.3.1 Synthesis of 15N labelled PtII complexes.............................................61 1.3.1.3.2 Characterization by X-ray diffraction ............................................... 62 1.3.1.3.3 Cytotoxicity ................................................................................ 63 1.3.2 Aquation studies of trans-PtII complexes by 2D [1H,15N] HSQC NMR and conductimetry ................................ 67 1.3.2.1 Introduction ...............................................69 1.3.2.2 Experimental ...............................................73 1.3.2.2.1 Materials............................................................................ 73 8 1.3.2.2.2 Instrumentation ...................................................................73 1.3.2.2.3 Methods ..............................................................................74 1.3.2.2.4 Synthesis .................................................................................77 1.3.2.3 Results and discussion.................................... 81 1.3.2.3.1 Synthesis.......................................................................... 81 1.3.2.3.2 Hydrolysis studies by 2D [1H,15N] HSQC NMR................................ 81 Assignments .................................................................................81 p K a determination ...........................................................................86 Kinetic studies and calculations of rate constants......................................................86 Half-Life Calculations .......................................................................90 Speciation profile under physiological conditions........................................................92 1.3.2.3.3 Aquation studies by conductimetry......................................................93 Hydrolysis-Conductivity ........................................................................93 Rate constants from conductivity...................................................................................94 1.3.3 Photoactivation of trans-PtII complexes in aqueous solution and photoinduction reactivity with nucleobases...... 97 1.3.3.1 Introduction............................................... 99 1.3.3.2 Experimental ............................................. 101 1.3.3.3 Results and discussion................................... 103 1.3.3.3.1 Photoactivation of trans-PtII complexes in aqueous solution .....103 1.3.3.3.2 Photoinduced reactivity of trans-PtII complexes with nucleobases................................................................................105 Reactivity of complex trans-[PtCl2(ipa)(ma)] with 5"-GMP....................................... 107 Reactivity of complex trans-[PtCl2(ipa)(ma)] with 5"-AMP........................................ 111 Reactivity of complex trans-[PtCl2(ipa)(ma)] with 9MetAde....................................114 Reactivity of complex trans-[PtCl2(ipa)(ma)] with 5"-CMP ........................................117 1.3.4 Photochemistry and electrochemistry studies of dihydroxido trans-PtIV complexes.............................121 1.3.4.1 Introduction.............................................. 123 1.3.4.2 Experimental ............................................. 125 1.3.4.2.1 Sample preparations ................................................................................125 1.3.4.2.2 Techniques ...........................................................................125 9 1.3.4.2.3 Irradiation....................................................................... 125 1.3.4.2.4 Cyclic voltammetry.................................................................................. 126 1.3.4.3 Results and discussion .................................. 127 1.3.4.3.1 Photochemistry................................................................. 127 1.3.4.3.2 Electrochemistry............................................................. 130 Conclusions. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 263 Capítulo 2. Introducción general, objetivos y planteamiento ...133 2.1 Introducción general............................................... 135 2.2 Objetivos y planteamiento ........................................ 151 Capítulo 3. Síntesis, caracterización y citotoxicidad de complejos trans-PtII y PtIV en las líneas celulares tumorales SF268, MCF-7 y NCI-H460 .......................................................155 3.1 Introducción........................................................ 157 3.2 Experimental ....................................................... 159 3.2.1 Materiales ................................................................... 159 3.2.2 Instrumentación ..................................................................... 159 3.2.3 Síntesis de complejos cis-PtII ................................................................................ 160 3.2.4 Síntesis de complejos trans-PtII ............................................................................161 3.2.5 Síntesis de complejos trans-PtIV........................................................................... 163 3.2.6 Estructuras de Rayos-X........................................................................................... 165 3.2.7 Estudios bioquímicos............................................................................171 3.3 Resultados y discusión ............................................. 173 3.3.1 Síntesis ............................................................................. 173 3.3.2 Caracterización por RMN............................................................................ 174 3.3.3 Determinación estructural por difracción de Rayos-X................................... 177 3.3.4 Citotoxicidad............................................................... 179 10 Capítulo 4. Estudios de hidrólisis de complejos trans-PtII por RMN 2D [1H,15N] HSQC y conductimetría.......................183 4.1. Introducción ....................................................... 185 4.2 Experimental........................................................ 193 4.2.1 Materiales.............................................................................193 4.2.2 Instrumentación...............................................................194 4.2.3 Métodos ...........................................................................194 4.2.4 Síntesis................................................................197 4.3 Resultados y discusión ............................................. 201 4.3.1 Síntesis .........................................................201 4.3.2 Caracterización por RMN de los compuestos cis- y trans-[15N-PtII] .......202 4.3.3 Estudios de hidrólisis..........................................................206 4.3.3.1 Asignación de señales y determinación de los valores de p K a ........................... 207 4.3.3.2 Cinética de hidrólisis y cálculo de constantes de velocidad............................... 216 Tiempos de vida media de las especies............................................................................ 221 Productos de hidrólisis y porcentajes bajo condiciones fisiológicas........................ 223 4.3.3.3 Estudios de hidrólisis por conductimetría............................................................ 223 Hidrólisis-conductividad............................................. 223 Cálculo de las constantes de velocidad de hidrólisis ................................................... 224 Capítulo 5. Fotoactivación de la hidrólisis de complejos trans-PtII y fotorreacciones con nucleobases ...............................227 5. 1 Introducción ....................................................... 229 5. 2 Experimental....................................................... 231 5. 3 Resultados y discusión ............................................ 233 5.3.1 Fotoactivación de la hidrólisis ................................................................................233 5.3.2 Fotorreacciones de complejos trans-PtII con nucleobases...........................236 5.3.2.1 Reacción del complejo trans-[PtCl2(ipa)(ma)] con 5"-GMP................................. 238 5.3.2.2 Reacción del complejo trans-[PtCl2(ipa)(ma)] con 5'-AMP............................ 243 5.3.2.3 Reacción del complejo trans-[PtCl2(ipa)(ma)] con 9MetAde.......................... 246 5.3.2.4 Reacción del complejo trans-[PtCl2(ipa)(ma)] con 5"-CMP ................................ 249 Capítulo 6 Fotoquímica y electroquímica de complejos dihidroxo trans-PtIV ..........................................................251 6.1 Introducción........................................................ 253 6.2 Experimental ....................................................... 255 6.2.1 Preparación de muestras .............................................................255 6.2.2 Técnicas de caracterización ..............................................................255 6.2.3 Irradiación................................................................255 6.2.4 Voltametría cíclica ....................................................................256 6.3 Resultados y discusión ............................................. 257 6.3.1 Fotoquímica ....................................................................257 6.3.2 Electroquímica ..................................................................259
