Aplicación de un ensayo ecotoxicógico que no requiere el uso de un kit y se basa en la luminiscencia de vibrio fischeri para el análisis de bloqueadores solares

• Autores: Ana Akemi Kitazono Sugahara, Pierinna M. Ratto, Lisveth Flores del Pino
• Localización: Revista de la Sociedad Química del Perú, ISSN-e 2309-8740, ISSN 1810-634X, Vol. 90, Nº. 1 (enero - marzo), 2024, 30 págs.
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Application of a kit-free ecotoxicity assay based on the luminescence of vibrio fischeri in the testing of sunscreens
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    Uno de los más usados bioensayos de ecotoxicidad se basa en la luminiscencia de Vibrio fischeri, para el que existen kits comerciales como el de Microtox® y varios otros. Sin embargo, este ensayo no puede ser siempre aplicado por varias razones. Por un lado, su protocolo no puede ser fácilmente adaptado o modificado, y además, requiere la adquisición continua del kit y la disponibilidad de equipamiento especializado o por lo menos, de un luminómetro. Como una alternativa versátil, este artículo describe un protocolo optimizado que no requiere el uso de un kit, denotado como “Macrotox”, que permite un rango amplio de periodos de tratamiento (por ejemplo, 1, 3, 7, 12, 24, 30 y 36 h), siguiendo los efectos en la luminiscencia y proliferación de. V. fischeri. Aunque el protocolo optimizado envuelve tratamientos de 1 mL, puede ser fácilmente adaptado para usar otros volúmenes y tiempos. Es importante destacar que, para evaluar los efectos en la luminiscencia, solo una cámara digital es necesaria para tomar las fotografías en laoscuridad, las que son luego analizadas mediante el software de acceso abierto Image J. Para la evaluación de los efectos sobre la proliferación, las densidades celulares son estimadas mediante mediciones espectrofotométricas. En este artículo, ambos métodos Microtox® y Macrotox fueron aplicados para la determinación de los niveles de ecotoxicidad de un bloqueador comercial y una loción humectante como control. Sin embargo, el protocolo Macrotox descrito puede ser similarmente aplicado para el ensayoecotoxicológico de cualquier otra muestra.

  • English

    One of the most used ecotoxicity bioassays is based on the luminescence of Vibrio fischeri, for which commercial kits such as Microtox® and several others are available. However, this assay might not always be suitable for several reasons: Its protocol cannot be easily adapted for particular purposes, and it requires the continuous purchases of the kit and the availability of specialized equipment or at least, a luminometer. As a versatile alternative, this paper describes an optimized and kit-free protocol, referred to as “Macrotox”, which allows a wide range of treatment periods (for example, 1, 3, 7, 12, 24, 30 and 36 h) to follow the effects on the luminescence and proliferation of V. fischeri. While the optimized protocol involves 1-mL treatments, it could be easily adapted to use other volumes and times. Importantly, to evaluate the effects on luminescence, only a digital camera is needed to take photographs in the dark, which are then analyzed using the open access software ImageJ. To evaluate the effects on proliferation, cell densities are estimated via spectrophotometric measurements. In this work, both the Microtox® and Macrotox protocols were applied for the determination of the ecotoxicities of a commercial sunscreen and a moisturizer as a control. However, the described Macrotox protocol can be similarly applied for the ecotoxicity assay of any sample.