Resumen de Efeito inibitório in vitro do gás ozônio sobre zoósporos e hifas de Pythium insidiosum

Caroline Quintana Braga, Cristina Gomes Zambrano, Mauro Pereira Soares, Augusto Duarte Brod, Henrique Zarnott Raatz, Lara Baccarin Ianiski, Sônia de Avila Botton, Daniela Isabel Brayer Pereira

• English

  This study evaluated the inhibitory effect of ozone gas (O3 ) on the mycelia and zoospores of Pythium insidiosum and verified the morphological changes it caused on the hyphae. The effects of O3 were evaluated on the mycelia (n = 21) and zoospores (n = 10) of P. insidiosum. O3 was bubbled into vials with sterile distilled water and mycelium or induction medium and zoospores. After 15 minutes, aliquots of mycelia and zoospores were grown on yeast agar at 37 °C/96 hours. Ozonated flasks were incubated at 37 ºC/72 hours; and every 24 hours, aliquots were subcultured at 37 ºC/96 hours. Transmission (TEM) and scanning (SEM) electron microscopy of O3 -exposed hyphae were performed. The results revealed that O3 inhibited microorganism growth in all ozonated suspensions. Conversely, in control suspensions, P. insidiosum growth occurred within 24 hours of incubation. In the SEM, the treated hyphae presented cavitations and cell wall continuity loss; in the TEM, the organelles and cytoplasmic membrane disappeared, and the cell wall was retracted. We demonstrated, for the first time, that O3 causes irreversible damage on P. insidiosum hyphae and prove in vitro oomicidal action on zoospores and hyphae

• português

  Este estudo avaliou o efeito inibitório do gás ozônio (O3 ) sobre o micélio e zoósporos de Pythium insidiosum e verificou as alterações morfológicas causadas pela ação do gás nas hifas do oomiceto. O efeito de O3 foi avaliado sobre o micélio (n = 21) e zoósporos (n = 10) de P. insidiosum. O3 foi borbulhado no interior de frascos contendo água destilada estéril e micélio ou meio de indução e zoósporos. Após 15 minutos, alíquotas de micélio e zoósporos foram cultivadas em ágar levedura a 37 ºC/96 horas. Os frascos ozonizados foram incubados a 37 ºC/72 horas; e a cada 24 horas, alíquotas foram recultivadas a 37 ºC/96 horas. Adicionalmente, realizou-se a microscopia eletrônica de transmissão (MET) e varredura (MEV) das hifas expostas ao gás. Os resultados revelaram que o O3 inibiu o crescimento do micro-organismo a partir de todas as suspensões ozonizadas. Por outro lado, nas suspensões controle o crescimento de P. insidiosum ocorreu em 24 horas de incubação. Na MEV evidenciou-se que as hifas tratadas apresentavam cavitações e perda da continuidade da parede celular; na MET as organelas e a membrana citoplasmática desapareceram e a parede celular estava retraída. Este estudo demonstra, pela primeira vez, que o O3 causa danos irreversíveis nas hifas de P. insidiosum e comprova a ação oomicida in vitro do gás sobre zoósporos e hifas