Resumen de Determinación enzimática de fosfolípidos que contienen colina en líquido amniótico

Karl Schosinsky-Nevermann, Manuel Jiménez, Carmen Olivia Dimas

• español

  Se describe un método para determinar en líquido amniótico los fosfolípidos que contienen colina, que se basa en la acción de la fosfolipasa D sobre los fosfolípidos, originando colina, que es oxidada por la colinaoxidasa a betaína con la producción simultánea de peróxido de hidrógeno, este último en presencia de peroxidasa oxida al fenol que se acopla a la 4-aminofenazona produciendo un cromógeno rojo. La intensidad del color a 500 nm es directamente proporcional a la concentración de fosfolípidos que contienen colina. El método es sencillo, rápido, relativamente económico, preciso, exacto y requiere poco volumen de muestra. El análisis comparativo con la determinación de lecitina mediante un método enzimático mostró un coeficiente de correlación (r) de 0,945 y una ecuación de regresión lineal y = 2,595 + 0,929x. El método presenta coeficientes de variación día a día de 2,6 y 4,5 por ciento para concentraciones de fosfolípidos de 12,4 y 4,3 mg/dL, respectivamente. El intervalo analítico es de 25,0 mg/dL. La sangre, la bilirrubina y el ácido ascórbico producen cierto grado de interferencia.

• English

  We describe a method for determining choline containing phospholipids in amniotic fluid. Phospholipase D is used to liberate choline from phospholipids, and the liberated choline is oxidized to betaine and hydrogen peroxide by choline oxidase. The hydrogen peroxide forms a colored complex with phenol and 4-aminoantipyrene in the presence of horseradish peroxidase, and the color is measured spectrophotometrically at 500 nm. The method is linear up to 25 mg/dL. Comparison of the assay (y) with an enzymatic method (x) demostrated a correlation coefficient of 0,945 (regression equation: y = 2,595 + 0,929x). The CV of the between run precision is 2,6 and 4,5 per cent for concentrations of 12,4 and 4,3 mg of phospholipids per 100 mL of amniotic fluid, respectively. The method is relatively simple, precise, and accurate, requires less time and sample that other methods for assessing fetal lung maturity. The procedure is affected by blood, ascorbic acid and bilirrubin.