Lectins of Erythrina poeppigiana and Erythrina steyermarkii (Leguminosae): characterization and mitogenic effect

• Silvia Quesada ^[1] ; Clara I Nanne ^[1] ; Luis González ^[2]
  1. [1] Universidad de Costa Rica

     Universidad de Costa Rica

     Hospital, Costa Rica

     
  2. [2] Instituto Costarricense de Investigación y Enseñanza en Nutrición y Salud

     Instituto Costarricense de Investigación y Enseñanza en Nutrición y Salud

     Tres Ríos, Costa Rica

     
• Localización: Revista de Biología Tropical, ISSN 0034-7744, Vol. 46, Nº. 4, 1998, págs. 1039-1046
• Idioma: inglés
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• Resumen
  • español

    Las diferentes especies de Erythrina se encuentran ampliamente distribuidas en Costa Rica y se las conoce popularmente con el nombre de "poró". En el presente estudio, se seleccionaron dos especies: Erythrina poeppigiana y Erythrina steyermarkii. Se prepararon extractos de las semillas en solución tampón salina de fosfatos y se verificó la presencia de lectinas en ellos mediante la técnica de hemaglutinación, utilizando eritrocitos humanos. Se trató de demostrar un efecto selectivo de la hemaglutinación empleando eritrocitos de varias especies de mamíferos, específicamente de carnero, caballo y conejo. Solo los eritrocitos de conejo fueron aglutinados con la lectina de E. steyermarkii. El efecto hemaglutinante de las dos lectinas fue inhibido con los siguientes carbohidratos: D-galactosa, N-D-acetil galactosamina, D-lactosa y D-rafinosa. La lectina de E. steyermarkii también fue inhibida con L-rhamnosa. Las dos lectinas fueron aisladas por filtración en gel y cromatografìa de afinidad, usando lactosa como ligando. Las fracciones que resultaron positivas se analizaron mediante la técnica de electroforesis en gel de poliacrilamida y duodecil sulfato de sodio (SDS-PAGE). Con la filtración en gel y el SDS-PAGE, se comprobó que las dos lectinas tienen una masa molecular aparente de 50 kDa y que están formadas por dos subunidades de 25 kDa, aproximadamente. Se buscó un efecto mitogénico en las dos lectinas y se encontró que sólo E. steyermarkii lo manifestaba sobre células mononucleares humanas aisladas de sangre periférica. Se determinó la estabilidad de las lectinas en diferentes ámbitos de temperatura (4 a 100 °C) y de pH (2 a 12 ). Las dos lectinas se mantuvieron estables en un rango de temperatura de 40 a 70 °C y en un pH de 2 a 10.

  • English

    Erythrina species are widely distributed in Costa Rica and known popularly as "poró". In this study, two species were selected, Erythrina poeppigiana and Erythrina steyermarkii. Seed extracts were prepared in phosphate-buffered saline. The presence of lectins in the extracts was verified by hemagglutinating effect over suspensions of human erythrocytes. A selective hemagglutinating effect on erythrocytes of several mammal species, goat, horse and rabbit red cells was tested; only the latter were agglutinated by E. steyermarkii. The hemagglutinating effect of both lectins was inhibited with the following carbohydrates: D-galactose, N-acetyl galactosamine, D-lactose and D-raffinose. The lectin from E. steyermarkii was also inhibited with L-rhamnose. Both lectins were isolated with gel filtration and affinity chromatography using lactose as ligand. Fractions that proved positive were tested with the sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Gel filtration and SDS-PAGE showed that these lectins have an apparent molecular mass of 50kDa, and are formed by two subunits of approximately 25 kDa. E. poeppigiana had no mitogenic effect, but the extract of E. steyermarkii had a mitogenic effect on human mononuclear cells isolated from peripheral blood. The stability of the lectins was tested at different temperature and pH ranges (4 to 100 °C) and at pH 2 to 12. Both were stable at a pH range from 2 to 10, and at temperatures from 40 to 70 °C.