Estandarización del inmunoensayo ELISA para la detección de IgG anti-Toxoplasma gondii en ratón

• NÉSTOR IVÁN CARDONA ^[1] ; FABIANA LORA ^[1] ; JORGE ENRIQUE GOMEZ ^[1]
  1. [1] Universidad del Quindío

     Universidad del Quindío

     Colombia

     
• Localización: Parasitología latinoamericana, ISSN-e 0717-7712, ISSN 0717-7704, Vol. 60, Nº. 1-4, 2005, págs. 97-101
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • STANDARIZATION OF AN ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY (ELISA) FOR DETECCTION OF SPECIFIC ANTI- Toxoplasma gondii IgG IN MICE
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  • español

    Se describe la estandarización de un inmunoensayo (ELISA) para la detección de IgG contra Toxoplasma gondii en ratones. Este ensayo tiene interés como herramienta en el estudio de cepas y en el diagnostico de la toxoplasmosis en muestras de origen humano. Se determinaron las mejores condiciones para la realización de la prueba (diferentes agentes bloqueadores y diferentes concentraciones de antígeno). No hubo diferencia significativa en cuanto a la función de los agentes bloqueadores, por lo que se decidió trabajar con tampón de recubrimiento con albúmina bovina al 1%. El valor óptimo de concentración de antígeno fue 20 µg/ml, para el conjugado la dilución óptima fue de 1:1.000. El punto de corte fue estimado como el promedio de los sueros negativos más dos desviaciones estándar (0,135). Todos los sueros negativos presentaron valores de absorbancia a 410 nm menores al punto de corte. No se encontraron diferencias para la detección entre cepas de T. gondii. Los resultados muestran que la prueba ELISA es altamente sensible y especifica y es de gran utilidad para la optimización de los procedimientos que se realizan en animales de laboratorio

  • English

    We describe a standardization of an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detection of specific anti-Toxoplasma gondii IgG in mice. This assay is important as a tool for strains charac-terization in T. gondii and for diagnosis of human toxoplasmosis. The technique was standardized by testing different conditions (different coating reagents and different amounts of antigen). No significant difference was observed between coating reagents; therefore buffer coating with bovine albumin 1% was chosen. The best amount of antigen was 20 µg/ml at a 1:1000 dilution of the secondary antibody. The cut-off was the average value of all negative serum + 2 deviation standard (0,135). Negative serum values were below of cut-off at 410 nm. We do not found differences in detection among strains of T. gondii. These results show that ELISA is highly sensitive and specific and is useful to improve efficiency in procedures that involve animals in the laboratory