Resumen de Cinética multiplicativa de clones de Crithidia fasciculata (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) en un sistema de cultivo in vitro

Olger Calderón Arguedas, Misael Chinchilla Carmona, Adrián Avendaño, María José Carvajal

• español

  La cinética multiplicativa de la cepa parental y cinco clones de Crithidia fasciculata (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) fue estudiada en agar sangre 40% difásico. Los clones fueron obtenidos de cultivos en agar sangre 40% y denominados Ia, IIIa, IVa, Va y CAA. En cada caso, tubos de agar sangre 40% difásico con infusión cerebro corazón 3,7 % como fase líquida fueron inoculados con 10³ coanomastigotos de cada clon y la cepa parental. La concentración de parásitos fue estimada semanalmente durante 12 semanas expresando las concentraciones en coanomastigotos/mm³. La variabilidad fue evaluada por análisis de variancia (ANDEVA) para mediciones repetidas (a:0,05) realizadas durante cada día de observación. Electroforesis en geles de poliacrilamida con dodecil sulfato de sodio (SDS-PAGE) fueron también efectuadas para evaluar los perfiles proteicos de los clones y la cepa parental. Los resultados mostraron una fase de crecimiento logarítmico muy corta que antecedió a una fase estacionaria prolongada. (p > 0,05). No hubieron diferencias estasdísticamente significativas entre la concentración de coanomastigotos/mm³ entre los sistemas estudiados durante cada día de observación. Los perfiles proteicos mostraron patrones altamente homogéneos en todos los sistemas estudiados. Los resultados sugieren que las menores presiones evolutivas que sufre naturalmente C. fasciculata en su ciclo propagativo podrían estar relacionadas con la homogeneidad observada, pero es requerida más información en tópicos como inmunología, biología y genética para demostrar dicha homogeneidad

• English

  The multiplicative kinetics in diphasic 40% blood-agar media was studied in five clones and the parental strain of Crithidia fasciculata (Kinetoplastida: Trypanosomatidae). The clones were obtained from cultures in 40% blood-agar and were named as Ia, IIIa, IVa, Va and CAA. In each case, diphasic blood agar media with brain heart infusion broth 3,7% was inoculated with 10³ choanomastigotes. The concentration of parasites were estimated weekly during 12 weeks expressing these concentrations in choanomastigotes/mm³. The variability was evaluated by ANOVA tests for repeated measures (á:0,05). Electrophoresis in polyacrylamide gel with sodium dodecil sulfate (SDS-PAGE) was also performed to evaluate the protein profiles of the clones and parental strain. The results showed a short logaritmic growth phase before a long stationary phase. There were not significant statistical differences in the concentration of choanomastigotes/mm³ between the studied systems during each day of observation (p > 0,05). The polypeptide profiles of the extracts showed highly homogeneus patrons. These results could suggest that the minor evolutive pressures that suffer naturally C. fasciculata in its propagative cycle in insects could be related to the observed homogenitiy but its needed more research in topics as inmunology, biology and genetics in order to demostrate this homogenity