Resumen de Repression of Ppargcla Gene in Liver of Hyperglycemic Rats Induced with High Fat Diet Combined with Streptozotocin
Alfonso Hernández, Rui Curi, Luis A Salazar
- español
La diabetes mellitus tipo 2 implica desregulación de varios procesos metabólicos, siendo la mantención de la glicemia uno de los más importantes. Varios genes están involucrados en este proceso. Así, el objetivo del presente estudio fue evaluar la expresión génica de genes relacionados a diabetes mellitus tipo 2 en hígado y páncreas de ratas con hiperglicemia inducida con una dieta alta en grasas junto con una baja dosis de estreptozotocina. Ratas hembra de 210 - 240 g fueron alimentadas con una dieta alta en grasas o con una dieta control por tres semanas. Al día 14, los animales alimentados con dieta alta en grasas fueron inyectados con una dosis baja de estreptozotocina (35 mg/kg), mientras las del grupo control fueron inyectadas con el vehículo. El peso corporal y las concentraciones plasmáticas de glucosa, triglicéridos y colesterol total, fueron medidos al inicio, al día 14 y al final del tratamiento. Al finalizar el tratamiento, los animales fueron sacrificados, el hígado y páncreas fueron quirúrgicamente removidos e inmediatamente congelados en nitrógeno liquido. El RNA fue extraído usando el reactivo TRIzol, tratado con DNasa I y posteriormente convertido a cDNA. Los análisis de expresión génica fueron realizados usando SYBR Green - real time PCR y el método del Cq comparativo. En hígado se estudiaron los genes Ahsg y Ppargc1a, mientras que en páncreas se analizaron los genes Slc2a2 y Kcnj11. Las ratas alimentadas con dieta alta en grasas y tratadas con streptozotocina mostraron niveles mayores de glucosa plasmática (17,09 ± 0,43 vs. 5,91 ± 0,29 mmol/L, p < 0,01) y una menor expresión hepática de Ppargc1a versus el grupo control (2 veces menor expresión, p < 0,05). En conclusión, la represión del gen Ppargc1a puede ser un importante proceso en el establecimiento de la hiperglicemia crónica, probablemente debido a una desregulación de la gluconeogénesis hepática. Sin embargo, estudios adicionales son necesarios para esclarecer el rol de esta desregulación en la homeostasis hepática de glucosa.
- English
Type 2 diabetes mellitus implies deregulation of multiple metabolic processes, being the maintenance of glycemia one of the most important. Many genes are involved in the deregulation of this particular process. Therefore, the aim of this study was to evaluate gene expression of genes related to type 2 diabetes mellitus, in the liver and pancreas of rats with hyperglycemia induced by high fat diet along with a low single dose of streptozotocin. Ahsg and Ppargc1a genes were studied in liver, whereas Kcnj11 and Slc2a2 genes were analyzed in pancreas. For this purpose, 210-240 g female rats were fed a high fat diet or a control diet for three weeks. At day 14, animals fed with high fat diet were injected with a single low dose of streptozotocin (35 mg/kg) and the control group rats were injected only with the vehicle. Plasmatic glucose, triglycerides and total cholesterol levels were measured at the beginning, day 14 and end of treatment. Body weight was also measured. Once the treatment was complete, rats were appropriately euthanized and then, pancreas and liver were surgically removed and frozen in liquid nitrogen. Total RNA was isolated using TRIzol reagent, treated with DNase I and reversely transcribed to cDNA. Gene expression analysis was performed using SYBR Green Real time PCR and comparative Cq method, using three reference genes. Rats fed with high fat diet and treated with streptozotocin showed higher values of plasmatic glucose (17.09 ± 0.43 vs. 5.91 ± 0.29 mmol/L, p < 0.01) and a minor expression of Ppargc1a versus the control group (2-fold less expressed, p < 0.05) in liver. We conclude that repression of Ppargc1a gene may be an important process in the establishment of chronic hyperglycemia, probably through deregulation of hepatic gluconeogenesis. However, further studies need to be performed in order to clarify the role of Ppargc1a deregulation in liver glucose homeostasis.
