Resumen de Seguridad biológica y ensayo in vitro de expresión génica en PBMC de caninos vacunados experimentalmente contra Toxocara canis
Dumar Alexander Jaramillo Hernández, Lida Carolina Lesmes Rodriguez, Neuza Maria Alcantara Neves
- español
La toxocariasis es una zoonosis desatendida de alta prevalencia e impacto en la salud pública de poblaciones empobrecidas del mundo, su agente causal es el nematodo del género Toxacara. Actualmente se utilizan antiparasitarios de amplio espectro para afrontar la enfermedad, sin embargo, no existe una vacuna para prevenirla. El objetivo de esta investigación fue evaluar la seguridad biológica de ensayos clínicos experimentales de vacunología inversa; y así mismo evaluar la respuesta in vitro de PBMC de caninos previamente vacunados con las proteínas recombinantes rTcVcan y rTcCad de Toxocara canis, a través del ensayo de expresión génica medida por RT-qPCR de citocinas IL-5, IL- 6, IL-17A, IL-10, TNF-α e INF-Ɣ. Como resultado, una vez realizados los ensayos clínicos para la vacunación de los cachorros, no se observaron diferencias con respecto a los rangos de referencia de los análisis de hematología, así como de los análisis de las funciones hepática y renal en los cachorros y; por otra parte, en los ensayos de expresión génica en PBMC, únicamente el gen ACTB se expresó con éxito, los genes referentes a las citocinas no presentaron resultados estadísticamente significativos. En conclusión, las formulaciones aplicadas no fueron tóxicas y no tuvieron efectos adversos en los animales experimentales y los ensayos de expresión génica en PBMC de los cachorros vacunados con las proteínas recombinantes rTcVcan y rTcCad contra T. canis no presentaron resultados concluyentes con respecto al éxito de estos procedimientos en la primera fase de la vacuna experimental.
- English
Toxocariasis is a neglected zoonosis with a high prevalence and impact on the public health of impoverished populations in the world, its causative agent is the nematode of the genus Toxacara. Broad-spectrum antiparasitics are currently used to deal with the disease, however, there is no vaccine to prevent it. The objective of this research was to evaluate the biological safety of experimental clinical trials of reverse vaccinology; and also, to evaluate the in vitro response of PBMC of canines previously vaccinated with the recombinant proteins rTcVcan and rTcCad of Toxocara canis, through the gene expression assay measured by RT-qPCR of IL-5, IL-6, IL-17. , IL-10, TNF-α and INF-Ɣ cytokines. As result, once the clinical trials for the vaccination of the puppies were carried out, no differences were observed with respect to the reference ranges of the hematology analysis, as well as the analyzes of the liver and kidney functions in the puppies and; on the other hand, in the gene expression assays in PBMC, only the ACTB gene was successfully expressed, the cytokine genes did not present statistically significant results. In conclusion, the applied formulations were not toxic and had no adverse effects on the experimental animals and gene expression assays in PBMC of vaccinated puppies with the recombinant rTcVcan and rTcCad proteins against T. canis did not show conclusive results regarding the success of these procedures in the first phase of the experimental vaccine.
- português
A toxocaríase é uma zoonose negligenciada de alta prevalência e impacto na saúde pública de populações empobrecidas no mundo, seu agente causal é o nematóide do gênero Toxacara. Atualmente, antiparasitários de amplo espectro são usados para tratar a doença, mas não há vacina para preveni-la. O objetivo desta pesquisa foi avaliar a segurança biológica de ensaios clínicos experimentais de vacinologia reversa; e também avaliar a resposta in vitro de PBMC de caninos previamente vacinados com as proteínas recombinantes rTcVcan e rTcCad de Toxocara canis, através do ensaio de expressão gênica medida por RT-qPCR das citocinas IL-5, IL-6, IL-17. , IL-10, TNF-α e INF-Ɣ. Como resultado, uma vez realizados os ensaios clínicos para a vacinação dos filhotes, não foram observadas diferenças com relação aos intervalos de referência da análise hematológica, bem como das análises das funções hepática e renal nos filhotes e; por outro lado, nos ensaios de expressão gênica em PBMC, apenas o gene ACTB foi expresso com sucesso, os genes relacionados a citocinas não apresentaram resultados estatisticamente significativos. Em conclusão, as formulações aplicadas não foram tóxicas e não causaram efeitos adversos nos animais experimentais e os ensaios de expressão gênica em PBMC dos filhotes vacinados com as proteínas recombinantes rTcVcan e rTcCad contra T. canis não apresentaram resultados conclusivos quanto ao sucesso dos esses procedimentos na primeira fase da vacina experimental.
