Técnica de reacción de polimerasa en cadena (QPCR) en tiempo real para la identificación y cuantificación de Streptococcus Mutans en saliva y biopelícula dentaria de niños

• Moncada-Cortés, Gustavo Adolfo ^[5] ; Duperat, Lorena del Carmen ^[1] ; Palma, Patricia ^[1] ; Corsini, Gino ^[2] ; Neira, Miguel ^[1] ; Reyes, Evelyn ^[1] ; Oliveira-Junior, Osmir Batista ^[3] ; Faleiros, Simone ^[1] ; Gordan, Valeria ^[4] ; Yévenes, Ismael ^[1]
  1. [1] Universidad de Chile

     Universidad de Chile

     Santiago, Chile

     
  2. [2] Universidad Autónoma de Chile

     Universidad Autónoma de Chile

     Temuco, Chile

     
  3. [3] Universidade Estadual Paulista

     Universidade Estadual Paulista

     Brasil

     
  4. [4] University of Florida

     University of Florida

     Estados Unidos

     
  5. [5] Universidad Mayor de Santiago

  Mostrar afiliaciones +
• Localización: Revista Facultad de Odontología: Universidad de Antioquia, ISSN 0121-246X, ISSN-e 2145-7670, Vol. 28, Nº. 1, 2016 (Ejemplar dedicado a: Revista Facultad de Odontología Universidad de Antioquia), págs. 71-94
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Real-time quantitative polymerase chain reaction (QPCR) for the identification and quantification of Streptococcus Mutans in saliva and dental biofilm in children
• Enlaces
  • Texto completo
• Resumen
  • español

    Introducción: el objetivo del presente estudio consistió en implementar la técnica de qPCR en tiempo real para identificar y cuantificar la especie Streptococcus mutans en muestras de saliva y biopelícula dentaria. Métodos: se seleccionaron al azar 27 niños de 8 años de edad, de nivel socio-económico bajo del área norte de la región metropolitana de Santiago de Chile, que se citaron en ayunas y sin cepillado durante al menos 12 horas, para colectar saliva no estimulada y un pool de biopelícula dentaria supragingival de todas las caras mesio-vestibulares de dientes anteriores y posteriores. Se cuantificó la cantidad de S. mutans en las muestras mediante qPCR empleando partidores que amplifican un fragmento del gen gtfB de S. mutans. Resultados: la amplificación presentó 98% de eficiencia con delta de fluorescencia de 3,36 ciclos. La curva de fusión (melting) presentó un solo máximo a una misma temperatura para todas las muestras. Conclusión: la metodología permite la identificación y cuantificación específica del gen gtfB de S. mutans en muestras de saliva y biopelícula dentaria, de forma rápida y exacta, aportando a la determinación del riesgo cariogénico individual.

  • English

    Introduction: the objective of this study was to use real-time qPCR to identify and quantify the Streptococcus mutans species in samples of saliva and dental biofilm. Methods: 27 children were randomly chosen with the following criteria: 8 years of age, low socio-economic levels, residing in the northern metropolitan area of Santiago de Chile; they were asked to attend an appointment while fasting with no teeth brushing for at least 12 hours, in order to collect non-stimulated saliva and a pool of supragingival dental biofilm of all the mesio-vestibular sides of anterior and posterior teeth. The amount of S. mutans in the samples was quantified by qPCR using primers that amplify a fragment of the gtfB gene of S. mutans. Results: the amplification showed 98% efficiency with a fluorescence of 3.36 cycles. The melting curve presented a single maximum at the same temperature for all samples. Conclusion: the methodology allows the specific identification and quantification of gene gtfB of S. mutans in saliva and dental biofilm in a quick and reliable manner, contributing to the identification of individual cariogenic risk.