Resumen de Extração e quantificação de anticorpos entivenenos em ovos de galinha contra veneno de escorpião

Mehvish Andleeb, Aleem Ahmed Khan

• English

  Avian-derived IgY is thought to be the best therapy for scorpion bites concerning low-level side effects. The present study analyzed a hypothesis about the neutralization of scorpion venom Androcotonus australis through antibodies produced in the egg yolks of chickens. The venom used for inoculation was obtained from Androctonus australis (yellow fat-tailed scorpion) from southern Punjab, Pakistan. The lethal dose of LD50 against scorpion venom was calculated in chickens and mice. Safe doses were given to egg-laying chickens to produce IgY antibodies. The antivenom IgY antibodies were extracted from the egg yolks of immunized chicken using the polyethylene glycol (PEG) method. Moreover, IgY was confirmed through sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and the Ouchterlony double immunodiffusion assay test. The antibody titers were evaluated by the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).

  The neutralisation capacity of extracted anti-scorpion antibodies was tested on mice. The calculated LD50 of scorpion venom for chicken and mice was 4 mg/kg and 2.5 mg/kg, respectively. SDS-PAGE and Ouchterlony double immunodiffusion confirmed the presence of IgY against scorpion venom. The maximum titer value of specific IgY produced against scorpion venom was 3.5 ug/ml. A concentration of 220 ul/LD50 was effective to neutralize 1 mg of scorpion venom. It is suggested that IgY obtained from egg yolks is safe against targeted venom and can be used as an effective alternative to equine IgG antibodies against scorpion envenoming

• português

  Acredita-se que a IgY derivada de aves seja a melhor terapia para picadas de escorpião em relação aos efeitos colaterais. O presente estudo teve como objetivo analisar uma hipótese sobre a neutralização do veneno do escorpião Androcotonus australis através de anticorpos produzidos na gema de ovos de galinhas. O veneno usado para inoculação foi obtido de Androctonus australis (escorpião amarelo de cauda gorda) do sul de Punjab, Paquistão. A dose letal de LD50 contra veneno de escorpião foi calculada em galinhas e camundongos. Doses seguras foram dadas a galinhas poedeiras para produzir anticorpos IgY. Os anticorpos antiveneno IgY foram extraídos das gemas de ovos de galinhas imunizadas pelo método do polietilenoglicol (PEG). Além disso, a IgY foi confirmada por eletroforese em gel de poliacrilamida e dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE) e pelo teste de imunodifusão dupla de Ouchterlony. Os títulos de anticorpos foram avaliados pelo ensaio imunoenzimático (ELISA). A capacidade de neutralização dos anticorpos anti-escorpião extraídos foi testada em camundongos. A LD50 calculada do veneno de escorpião para galinhas e camundongos foi de 4 mg/kg e 2,5 mg/kg, respectivamente. SDS-PAGE e imunodifusão dupla Ouchterlony confirmaram a presença de IgY contra veneno de escorpião. O valor máximo do título de IgY específico produzido contra veneno de escorpião foi de 3,5 ug/ml. Uma concentração de 220 ul/LD50 foi considerada eficaz para neutralizar 1 mg de veneno de escorpião.

  Sugere-se que a IgY obtida da gema do ovo seja segura contra o veneno direcionado e possa ser usada como uma alternativa eficaz aos anticorpos IgG equinos contra o envenenamento por escorpiões