Efecto de diferentes tiempos de centrifugación utilizando el gradiente de Percoll 45-90% sobre la integridad de la membrana plasmática de espermatozoides bovinos

• Camargo, K.D. ^[1] ; Pagoada, A.A. ^[1] ; Hincapié, J.J ^[1] ; Castillo, R. ^[1]
  1. [1] Escuela Agrícola Panamericana. Tegucigalpa. Honduras.
• Localización: Archivos de zootecnia, ISSN-e 1885-4494, ISSN 0004-0592, Vol. 72, Nº 278, 2023, págs. 107-114
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Effect of different centrifugation times using the 45-90% Percoll gradient on bovine sperm plasma membrane integrity
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• Resumen
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    La centrifugación de espermatozoides bovinos en el gradiente de Percoll 45-90%, es una técnica utilizada en la fertilización in vitro. Los objetivos del estudio fueron: determinar los porcentajes de espermatozoides con endósmosis positiva (EP) y negativa (EN), motilidad individual (MI), viabilidad (vivos y muertos) y morfología normal de cabeza y cola a diferentes tiempos de centrifugación. Para la endósmosis celular se utilizó la prueba HOST, en viabilidad, la coloración de eosina-nigrosina y en morfología, la coloración Spermac®️ de Minitube. Se evaluaron cuatro tratamientos con seis repeticiones: semen descongelado y centrifugado en gradiente de Percoll 45-90% durante 5, 10 y 15 minutos y semen descongelado únicamente (control). Para la prueba HOST, los porcentajes de EP para los tiempos de 15, 10 y 5 minutos de centrifugación fueron similares con valores de 73.92%, 75.19% y 73.63% respectivamente, sin embargo, estos difieren del control con 65.11% (P≤0.05); los porcentajes de MI para los tiempos de 15, 10 y 5 minutos de centrifugación fueron 92.00%, 93.00% y 91.50% siendo similares entre sí, pero estos difieren del control con 69.5% (P≤0.05). La viabilidad fue de 71.32%, 71.42% y 73.56% para los tiempos de 15, 10 y 5 minutos respectivamente y difieren del control con 56.63% (P≤0.05). En la morfología de cabeza y cola normales, no hubo diferencias significativas (P>0.05) con valores superiores al 92% y 82% respectivamente. Se concluye que la centrifugación durante 5, 10 o 15 minutos cuando se realiza el gradiente de Percoll 45-90% no afectan la integridad de la membrana plasmática de los espermatozoides bovinos.

    Information Cronología

  • English

    The centrifugation of bovine sperm in the 45-90% Percoll gradient is a technique used in in vitro fertilization. The objectives of the study were: to determine the percentages of sperm with positive endosmosis (PE) and negative (NE), individual motility (IM), viability (alive and dead) and normal head and tail morphology at different centrifugation times. The HOST test was used for cell endosmosis, the eosin-nigrosin staining for viability and the Minitube Spermac staining for the morphology. Four treatments were evaluated with six repetitions: thawed and centrifuged semen in 45-90% Percoll gradient for 5, 10 and 15 minutes and thawed semen only (control). For the HOST test, the percentages of PE for the 15, 10 and 5 minute centrifugation times were similar with values of 73.92%, 75.19% and 73.63% respectively, however, these differ from the control with 65.11% (P≤0.05); the IM percentages for the 15, 10 and 5 minute centrifugation times were 92.00%, 93.00% and 91.50%, being similar to each other, but these differ from the control with 69.5% (P≤0.05). The viability was 71.32%, 71.42% and 73.56% for the times of 15, 10 and 5 minutes respectively and they differed from the control with 56.63% (P≤0.05). In normal head and tail morphology, there were no significant differences (P>0.05) with values higher than 92% and 82% respectively. It is concluded that centrifugation during 5, 10 or 15 minutes when performing the 45-90% Percoll gradient, does not affect the integrity of the plasma membrane of bovine sperm.