Resumen de Purificación de PvRNS3: una ribonucleasa T2 de judía

Mª Mercedes Díaz Baena, Gregorio Gálvez Valdivieso, Pedro Piedras Montilla

• español

  Los ácidos nucleicos son compuestos relativamente abundantes y que, apartede tener un papel crucial en el almacenamiento y transmisión de la informacióngenética, pueden jugar un papel importante en la movilización de nutrientes. Lasribonucleasas son enzimas que catalizan la degradación de ARN en compuestosmás pequeños. Entre ellas, la familia T2 es la más extendida entre los seres vivos,lo que indica su implicación en importantes funciones biológicas. En plantas, lasribonucleasas T2 se clasifican en 2 sub-familias y 3 clases e intervienen en diversosprocesos como la defensa, el reconocimiento o rechazo del polen, el mantenimientode la homeostasis celular o el reciclaje de nutrientes. En este estudio se hasobreexpresado en E. coli la ribonucleasa de judía codificada por el gen PvRNS3, se ha purificado y se ha caracterizado. La proteína pura presenta actividad degradadorade ARN total, ARNr ARNt, pero no degrada ADN de simple o doble cadena,lo que confirma que se trata de una ribonucleasa funcional. En un trabajo previose observó la inducción de PvRNS3 en situaciones de estrés salino en radícula dejudía [3]. En este trabajo, se ha analizado el patrón de expresión de este gen endistintos tejidos de judía en situaciones de no estrés.

• English

  Nucleic acids are relatively abundant compounds that, apart from having a crucialrole in the storage and transmission of genetic information, may play an importantrole in nutrient mobilization. Ribonucleases are the enzymes that catalyzethe degradation of RNA into smaller compounds, being the T2 family the mostwidespread among living beings. This fact indicates its involvement in importantbiological functions. In plants, T2 ribonucleases are classified into two familiesand three classes and play a role in diverse processes such as defense, pollenrecognition, housekeeping or nutrient recycling. In this study, common bean ribonucleaseencoded by the PvRNS3 gene has been overexpressed in E. coli, purifiedand characterized. The pure protein presents total RNA, rRNA and tRNA degradingactivity but does not degrade single or double-stranded DNA, confirming that it isa functional ribonuclease. In a previous study, the induction of PvRNS3 in commonbean radicles under salt stress situation was demonstrated [3]. The expressionpattern of this gene in different common bean tissues was analyzed under nonstresssituations.