México
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Introducción. La leishmaniasis es un espectro de enfermedades transmitidas por vector causada por protozoarios del género Leishmania sp. En México, especies endémicas del complejo Leishmania (L.) mexicana son las causantes de leishmaniasis cutánea.
Durante el desarrollo del parásito en el vector y en cultivo, se ha descrito el proceso de metaciclogénesis que consiste en cambios morfológicos y bioquímicos para la transformación de promastigotes procíclicos en promastigotes metacíclicos.
Objetivo. Caracterizar el proceso de metaciclogénesis en cultivos axénicos de Leishmania (L.) mexicana.
Materiales y métodos. En cultivos de promastigotes de L. (L.) mexicana se evaluaron diferentes parámetros diariamente y a la misma hora durante 15 días para conocer los cambios a través del tiempo. Se analizó la densidad celular, morfología y parámetros de viabilidad celular por microscopía óptica y citometría de flujo.
Resultados. Durante el seguimiento de la curva de crecimiento se identificaron 3 etapas;
a) fase logarítmica, del día 0 al 6, predominan promastigotes procíclicos, poseen mayor tamaño, son viables, metabólicamente activos y con alta tasa de replicación; b) fase estacionaria, del día 7 al 10, predominan promastigotes metacíclicos, son delgados y alargados, una proporción de los parásitos presentan pérdida de viabilidad; c) fase de declive, a partir del día 11, hay disminución de la densidad celular y los parásitos restantes presentan características apoptóticas.
Conclusiones. La caracterización de la curva de crecimiento de L. mexicana permite identificar fácil, rápido y a bajo costo, cuando hay mayor proporción y calidad de promastigotes metacíclicos, reduciendo la variabilidad en los resultados de experimentos in vitro e in vivo
Introduction. Leishmaniasis is a spectrum of vector-borne diseases caused by protozoa of the genus Leishmania sp. In Mexico, species of the Leishmania (L.) mexicana complex are endemic and cause cutaneous leishmaniasis. During the development of the parasite in the vector and in culture, the process of metacyclogenesis has been described, which consists of morphological and biochemical changes for the transformation of procyclic promastigotes into metacyclic promastigotes.
Objective. To characterize the process of metacyclogenesis in axenic cultures of Leishmania (L.) mexicana.
Materials and methods. In promastigote cultures of L. (L.) mexicana, different parameters were evaluated daily for 15 days to determine changes over time. Cellularity, morphology, and cell viability parameters were analyzed by optical microscopy and flow cytometry.
Results. In the growth curve, three stages were identified. a) Logarithmic phase, from day 0 to 6, procyclic promastigotes predominate, they are larger, viable, metabolically active and have a high replication rate;
b) stationary phase, from day 7 to 10, metacyclic promastigotes are abundant, they are thin and elongated, there is a proportion of the parasites with loss of viability; c) death phase, from day 11, there is a decrease in cell density and the remaining parasites present apoptotic characteristics.
Conclusion. The characterization of the growth curve of L. (L.) mexicana allows to identify easily, quickly, and at low-cost, the time when there is a higher proportion of metacyclic promastigotes in culture, reducing the variability in the results of in vitro and in vivo experiments.
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