Detección molecular de un fragmento del virus de lengua azul en borregos de diferentes regiones de México

• Edith Rojas Anaya ^[1] ; Fernando Cerón-Téllez ^[1] ; Luis Adrián Yáñez-Garza ^[2] ; José Luis Gutiérrez-Hernández ^[1] ; Rosa Elena Sarmiento-Salas ^[2] ; Elizabeth Loza-Rubio ^[1]
  1. [1] Instituto Nacional de Investigaciones Forestales Agrícolas y Pecuarias

     Instituto Nacional de Investigaciones Forestales Agrícolas y Pecuarias

     México

     
  2. [2] Universidad Nacional Autónoma de México

     Universidad Nacional Autónoma de México

     México

     
• Localización: Revista Mexicana de Ciencias Pecuarias, ISSN 2007-1124, ISSN-e 2448-6698, Vol. 14, Nº. 1, 2023, págs. 110-121
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Molecular detection of a fragment of bluetongue virus in sheep from different regions of Mexico
• Enlaces
  • Texto completo
• Resumen
  • español

    La enfermedad de la lengua azul (LA) afecta diferentes especies de rumiantes silvestres y domésticos. En México, la enfermedad producida por el virus de la lengua azul (VLA), aún es reconocida como exótica, a pesar de que, en diferentes ocasiones se han detectado anticuerpos. El objetivo fue establecer técnicas moleculares usando un gen sintético que incluye los genes NS1 y NS3 como control positivo para establecer el diagnóstico del VLA en muestras de ovinos de diferentes regiones del país, mediante técnicas moleculares. Se obtuvieron 320 muestras totales de sangre completa de ovinos. Las muestras obtenidas se evaluaron mediante RT-PCR punto final y RT-PCR en tiempo real estableciendo las condiciones por el grupo de trabajo. Se encontraron 12 muestras positivas de ovinos a la detección de NS1; estas muestras se secuenciaron obteniendo un fragmento de 101 pares de bases. Al realizar el alineamiento se obtuvieron identidades con secuencias reportadas en el GenBank con fragmentos de NS1 desde 89 % (p= 1e-12) a 98 % (p= 4e-13), correspondientes a los serotipos 10, 11 y 12. De estas muestras, se obtuvieron dos muestras positivas de ovinos mediante el PCR tiempo real (PCR-tr), uno proveniente de Chiapas (raza Chiapas) y el otro de Tamaulipas (raza Suffolk). Los resultados de la PCRtr fueron corroborados por la CPASENASICA. Este trabajo, aporta por primera vez en México, la importancia de usar un gen sintético como control positivo, para realizar la detección en laboratorios oficiales BSL-2, lo cual en una emergencia sanitaria es de suma importancia.

  • English

    Bluetongue disease (BTD) affects various species of wild and domestic ruminants. In Mexico, the disease, caused by the bluetongue virus (BTV) is still regarded as exotic, despite the fact that antibodies have been detected on several occasions. The objective was to establish molecular techniques using a synthetic gene, including the genes NS1 and NS3 as positive controls for the diagnosis of BTV in samples of sheep from different regions of the country. A total of 320 total whole blood samples were obtained from sheep. The samples obtained were evaluated by end-point RT-PCR and real-time RT-PCR, the conditions having been established by the work group. Twelve sheep samples were found to be positive for the detection of NS1; these samples were sequenced, and a fragment of 101 base pairs was obtained. Upon alignment, were obtained identities with sequences reported in GenBank with NS1 fragments ranging from 89 % (p= 1e-12) to 98 % (p= 4e-13), corresponding to serotypes 10, 11 and 12. From these samples, two positive sheep samples were obtained using realtime PCR (RT-PCR): one from Chiapas (Chiapas breed), and the other, from Tamaulipas (Suffolk breed). The results of the RT-PCR were corroborated by CPA-SENASICA. This work provides evidence, for the first time in Mexico, of the importance of using a synthetic gene as a positive control to perform BSL-2 detection in official laboratories, which in a health emergency is of utmost importance.