Detection of pork adulteration in beef with ladder-shape melting temperature isothermal amplification (LMTIA) assay

• Wang Yongzhen ^[1] ; Borui Wang ^[2] ; Deguo Wang ^[1]
  1. [1] Xuchang University

     Xuchang University

     Jian'an District, China

     
  2. [2] Henan University of Science and Technology

     Henan University of Science and Technology

     China

     
• Localización: CyTA: Journal of food, ISSN 1947-6337, ISSN-e 1947-6345, Vol. 20, Nº. 1, 2022, págs. 244-250
• Idioma: inglés
• Títulos paralelos:
  • Detección de la presencia de carne de cerdo en la carne de vacuno adulterada empleando el ensayo de amplificación isotérmica de la temperatura de fusión en forma de escalera (LMTIA)
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• Resumen
  • español

    La amplificación isotérmica a temperatura de fusión en forma de escalera (LMTIA) es una tecnología desarrollada recientemente. Este estudio se propuso realizar el ensayo LMTIA para detectar la presencia de carne de cerdo en la carne de vacuno. Los iniciadores LMTIA fueron diseñados con el gen del receptor de prolactina de Sus scrofa como objetivo. Se optimizó el sistema de reacción LMTIA y se determinó el rendimiento del ensayo LMTIA en cuanto a especificidad, sensibilidad y límite de detección (LOD). Los resultados mostraron que el ensayo LMTIA fue capaz de detectar específicamente 10 ng de ADN genómico (gDNAs) procedente de Sus scrofa, que su sensibilidad fue de 1 ng de ADN genómico de Sus scrofa, y el ensayo LMTIA detectó la presencia de carne de cerdo en la carne de vacuno adulterada con un LOD de 0.1%, siendo este el mismo que el reportado por los ensayos PCR y LAMP. Este estudio es prometedor, ya que podrá facilitar la vigilancia de la adulteración comercial de la carne de vacuno con carne de cerdo.

  • English

    The ladder-shape melting temperature isothermal amplification (LMTIA) is a newly developed technology, and the objective of this study is to establish the LMTIA assay for detection of pork in beef. The LMTIA primers were designed with the prolactin receptor gene of Sus scrofa as the target. The LMTIA reaction system was optimized, and the performance of the LMTIA assay in specificity, sensitivity and detection limit (LOD) was determined. Our results showed that the LMTIA assay was able to specifically detect 10 ng genomic DNA (gDNAs) of Sus scrofa, the sensitivity of the LMTIA assay was 1 ng genomic DNA of Sus scrofa, and the LMTIA assay was able to detect the pork adulterated in beef with 0.1% LOD, which was the same as that of reported PCR assay or LAMP assay. This study holds a promise for facilitating the surveillance of the commercial adulteration of pork in beef.