Luvia Enid Sánchez Torres, Alejandra Espinosa Bonilla, Fernando Diosdado Vargas
La citometría de flujo es una tecnología que ha favorecido el rápido avance de muchas y muy diversas áreas de la ciencia, ya que permite la medición simultánea de múltiples características de cada una de las partículas o células individuales que se encuentran en una muestra mientras pasan a gran velocidad a través de una zona iluminada por uno o varios láseres. La información obtenida incluye datos sobre el tamaño y la complejidad interna, así como otros parámetros inherentes a cada una de las partículas presentes en la muestra, los cuales son captados por el equipo como señales luminosas. Las partículas más comúnmente analizadas en los citómetros de flujo son células, así que puede analizarse la expresión de moléculas tanto en su superficie como en su interior, la viabilidad, la funcionalidad, la proliferación celular, el contenido de ADN y la producción de citocinas entre muchas otras. Estas determinaciones pueden realizarse gracias a la utilización de anticuerpos acoplados a fluorocromos o bien, al uso de moléculas cuya fluorescencia depende de la característica que se quiera evaluar. Algunos citómetros de flujo son además clasificadores (“sorters”), lo que implica que el equipo puede separar físicamente las células que presentan las características de interés y además, es factible que una vez que han sido purificadas, éstas puedan emplearse en posteriores experimentos. En esta revisión se concentran los fundamentos de la citometría de flujo y sus principales aplicaciones, las cuales ofrecen una gran ventana de oportunidad en el ámbito veterinario, tanto en investigación como en la clínica.
Flow cytometry is a technology that has helped to rapidly advance many diverse areas of science by allowing the simultaneous measurement of multiple characteristics of each of the individual particles or cells in a sample as they pass at high speed through an area illuminated by one or more lasers. The information obtained includes data on the size and internal complexity, as well as other parameters inherent to each of the particles present in the sample, which are captured by the equipment as light signals. The most common particles analyzed in flow cytometers are cells, so the expression of molecules on their surface and inside, viability, functionality, cell proliferation, DNA content, cytokine production and many others can be analyzed. These determinations can be carried out by using antibodies coupled to fluorochromes or by using molecules whose fluorescence depends on the characteristic to be evaluated. Some flow cytometers are also sorters, which means that the equipment can physically sort those cells that exhibit the characteristics of interest; in addition, it is feasible that once they have been purified, they can be used in subsequent experiments. This review focuses on the fundamentals of flow cytometry and its main applications, which offer a great window of opportunity in the veterinary field, both in research and in the clinic.
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