Inmunohistoquímica en ganglios transparentes tras marcaje retrógrado de neuromas experimentales

• Autores: Laura Bernal Villada
• Localización: Séptimas Jornadas de Jóvenes Investigadores de la Universidad de Alcalá. Ciencias e Ingenierías / coord. por Antonio Guerrero Ortega, Germán Ros Magán, Paloma Ruiz Benito, Francisco José Pascual Vives, Cristina Tejedor Martínez, María Vanessa Tabernero Magro, 2019, ISBN 978-84-17729-43-1, págs. 105-114
• Idioma: español
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• Resumen
  • español

    En los últimos años se han desarrollado técnicas que consiguen hacer transparente muestras de tejido y con ello mejorar la adquisición de imágenes y reconstrucciones 3D. Basado en nuestro interés, nos propusimos adaptar un protocolo para hacer transparentes ganglios de la raíz dorsal de ratón dónde fuéramos capaces de distinguir poblaciones de neuronas encargadas de la transmisión de estímulos de dolor. Este protocolo es compatible con el marcador retrógrado Fluororuby, que marca selectivamente axones dañados. Además, es posible realizar inmunotinción en flotación con IB4 (neuronas no peptidérgicas) y observar al microscopio la muestra entera. Creemos que la aplicación de este tipo de técnicas facilitaría el estudio del sistema nervioso periférico en condiciones fisiológicas y patológicas.

  • English

    In the last decade, the number of techniques to make transparent tissue sample have increased, hence, improving images acquisition and 3D reconstructions. Based on our research interest, we adapted a protocol to make transparent dorsal root ganglia from mice, to distinguish populations of neurons involved in the transmission of pain stimuli. The protocol described here is compatible with the retrograde tracer Fluororuby, which selectively marks damaged axons. Furthermore, it is possible to perform free-floating immunostaining with IB4 (non-peptidergic neurons) and observe the entire sample under a microscope. We believe that the application of these methodologies would facilitate the study of the peripheral nervous system in physiological and pathological conditions.