Resumen de Efecto inhibitorio del extracto de persea americana (semilla de aguacate) a diferentes tiempos y concentraciones sobre streptococcus mutans
Diego Paul Hidalgo Muñoz, Marina Antonia Dona Vidale
- español
El propósito de este trabajo de investigación fue comprobar el efecto inhibitorio del extracto de Persea americana (semilla de aguacate) en concentraciones del 50%, 75% y 100%, a las 24, 48 y 72 horas sobre Streptococcus mutans, debido a que estudios científicos han demostrado que la semilla de aguacate contenía flavonoides, taninos y alcaloides que inhiben el crecimiento bacteriano. Idris et al. en su investigación comprobó que el extracto de acetato de etilo de semilla de aguacate resultó efectivo contra microorganismos como Staphylococcus aureus y Streptococcus pyogenes. El diseño metodológico de esta investigación fue de tipo experimental in vitro, analítico, observacional y longitudinal. La muestra fue de 50 discos de papel filtro blanco, mismos que se distribuyeron de la siguiente manera: 10 discos para cada concentración del extracto de Persea americana al 50%, 75% y 100%. Además 10 discos para la clorhexidina al 0,12% como control positivo y 10 discos para el agua destilada utilizado como control negativo; haciendo un total de 5 grupos. Además, se realizaron tres medidas en tres momentos de valoración a las 24, 48 y 72 horas. El procedimiento realizado para la obtención del extracto de Persea americana fue a través de la recolección de la materia prima en la provincia de Manabí en el Cantón El Carmen, donde se trasladó hasta las instalaciones del Laboratorio de Ciencias de Alimentos de la Facultad de Ciencias Agropecuarias de la Universidad Laica Eloy Alfaro de Manabí. Para la obtención del extracto se procedió a rallar y luego a secar a temperaturas de 45ºC y 50ºC, posteriormente se procedió a obtener el extracto acuoso a 50%, 75% y 100% de concentración. Se utilizó un equipo de destilación certificado con (Norma ISO/IEC 17025. Requisito para laboratorios de ensayo y calibración) en el que se mantuvo en una temperatura de 25 º C a 30 º C con la finalidad de evitar pérdidas de extractos esenciales por volatilización. Se realizó tres destilaciones, cada una con una duración de 3h, se utilizó 5 kg de Persea rallada para la concentración del 100%, 4kg de Persea rallada para la concentración del 75% y 3kg de Persea rallada para el 50% de concentración. Posterior a la obtención se realizó la colocación de 10 discos en cada caja Petri embebidos de extracto de Persea americana en concentraciones de 50%,75% y 100%, 10 discos para control positivo y 10 discos para control negativo, incubados a una temperatura de 37°C; el estudio fue analizado transcurridas las 24, 48 y 72 horas, tiempos en los que fue medido el halo de inhibición con el pie de rey milimetrado, mediante la Escala de Duraffourd. Estadísticamente se observó que tanto para la prueba de Kolmogorov con corrección de Lilliefors (n <50) o con la prueba de Shapiro Wilks, los datos referidos al halo de inhibición se ajustaron a la distribución normal (p<0,05) en todos los grupos, incluso en algunos grupos los valores fueron constantes entre los dos estadísticos (Persea americana las tres concentraciones y control tanto negativo como positivo), por lo que fue necesario emplear la estadística no paramétrica para el análisis inferencial. En las dos pruebas se pudo demostrar que se cumple la hipótesis de investigación; que existe un alto nivel de inhibición del extracto acuoso de Persea americana en las tres concentraciones y a los tres tiempos se logra tener un efecto inhibitorio, entre muy sensible y súper sensible, según la escala de Duraffourd. Una vez realizado todo el proceso investigativo se comprobó que el extracto al 100% y a las 72 horas, tuvo un halo de inhibición de 24 mm, superando al Gold Estándar, que llega a 21mm. En base a la evidencia estadística, se determinó que la capacidad inhibitoria es importante frente a Streptococcus Mutans, para el extracto de Persea americana al 100%, aunque ésta es mayor respecto al control positivo.
- English
The purpose of this research was to test the inhibitory effect of Persea americana (avocado seed) extract at concentrations of 50%, 75% and 100% at 24, 48 and 72 hours on Streptococcus mutans, because scientific studies have shown that avocado seed contained flavonoids, tannins and alkaloids that inhibit bac-terial growth. Idris et al. in their research found that the ethyl acetate extract of avocado seed was effective against microorganisms such as Staphylococcus aureus and Streptococcus pyogenes. The methodological design of this research was in vitro experimental, analytical, observational and longitudinal. The sample consisted of 50 white filter paper discs, which were distributed as follows: 10 discs for each concentration of Persea americana extract at 50%, 75% and 100%. In addition, 10 discs for the 0.12% chlorhexidine as positive control and 10 discs for the distilled water used as negative control; making a total of 5 groups. In addition, three measurements were taken at three titration times at 24, 48 and 72 hours. The procedure carried out to obtain the Persea americana extract was through the collection of the raw material in the province of Manabí in the canton of El Carmen, where it was taken to the Food Science Laboratory of the Faculty of Agricultural Sciences of the Universidad Laica Eloy Alfaro de Manabí. To obtain the extract, it was grated and then dried at temperatures of 45ºC and 50ºC, after which the aqueous extract was obtained at 50%, 75% and 100% concentration. Distillation equipment certified to ISO/IEC 17025 stan-dard (ISO/IEC 17025. Requirement for testing and calibration laboratories) was used, which was kept at a temperature of 25ºC to 30ºC in order to avoid loss of essential extracts through volatilisation. Three distillations were carried out, each lasting 3 hours, using 5 kg of grated Persea for the 100% concentration, 4 kg of grated Persea for the 75% concentration and 3 kg of grated Persea for the 50% concentration. After obtaining the extract, 10 discs were placed in each Petri dish soaked in Persea americana extract at concentrations of 50%, 75% and 100%, 10 discs for positive control and 10 discs for negative control, incubated at a temperature of 37°C; the study was analysed after 24, 48 and 72 hours, at which time the inhibition halo was measured with the millimetric caliper, using the Duraffourd scale. Statistically, it was observed that both for the Kolmogorov test with Lilliefors correction (n < 50) or with the Shapiro Wilks test, the data referring to the inhibition halo adjusted to the normal distribution (p<0.05) in all the groups, even in some groups the values were constant between the two statistics (Persea americana the three concentrations and both negative and positive control), so it was necessary to use the non-parametric statistics for the inferential analysis. In the two tests it was possible to demonstrate that the research hypothesis is fulfilled; that there is a high level of inhibition of the aqueous extract of Persea americana in the three concentrations and at the three times it manages to have an inhibitory effect, between very sensitive and super sensi-tive, according to the Duraffourd scale. Once the entire research process had been carried out, it was found that the extract at 100% and at 72 hours had an inhibition halo of 24 mm, exceeding the Gold Standard, which reaches 21 mm. Based on the statistical evidence, it was determined that the inhibitory capacity against Streptococcus Mutans is significant for the 100% Persea americana extract, although it is greater than the positive control.
- português
O objetivo deste trabalho de pesquisa foi testar o efeito inibitório do extrato de Persea americana (semente de abacate) em concentrações de 50%, 75% e 100%, às 24, 48 e 72 horas em Streptococcus mutans, pois estudos científicos mostraram que a semente de abacate continha flavonóides, taninos e alcalóides que inibiam o crescimento bacteriano. Idris et al. em suas pesquisas provaram que o extrato de acetato etílico de semente de abacate era eficaz contra microorganismos como Staphylococcus aureus e Streptococcus pyogenes. O projeto metodológico desta pesquisa foi experimental in vitro, analítico, observacional e longitudinal. A amostra consistia de 50 discos de papel filtro brancos, que foram distribuídos da seguinte forma: 10 discos para cada con-centração de extrato Persea americana a 50%, 75% e 100%. Além disso, 10 discos para clorexidina a 0,12% como controle positivo e 10 discos para água destilada usada como controle negativo; perfazendo um total de 5 grupos. Além disso, foram feitas três medições em três momentos de avaliação às 24, 48 e 72 horas. O procedimento realizado para obter o extrato da Persea americana foi através da coleta da matéria-prima na província de Manabi, no Cantão El Carmen, onde foi transferida para as instalações do Laboratório de Ciências da Alimentação da Faculdade de Ciências Agrárias da Universidade Laica Eloy Alfaro de Manabi. Para obter o extrato, ele foi ralado e depois seco a temperaturas de 45ºC e 50ºC, depois o extrato aquoso foi obtido a 50%, 75% e 100% de concentração. Foi utilizado um equipamento de destilação certificado com (ISO/IEC 17025. Exigência de laboratórios de teste e calibração) no qual foi mantido a uma temperatura de 25 º C a 30 º C para evitar a perda de extratos essenciais por volatilização. Foram realizadas três destilações, cada uma com duração de 3h, 5 kg de Persea ralada para a concentração de 100%, 4 kg de Persea ralada para a concentração de 75% e 3 kg de Persea ralada para a concentração de 50%. Após a obtenção, 10 discos foram colocados em cada prato Petri embebido em extrato Persea americana em concentrações de 50%, 75% e 100%, 10 discos para controle positivo e 10 discos para controle negativo, incubados a uma temperatura de 37°C; o estudo foi analisado após 24, 48 e 72 horas, momentos em que a auréola de inibição foi medida com o calibrador milimétrico, através da Escala Duraffourd. Estatisticamente foi observado que tanto para o teste de Kolmogorov com correção de Lilliefors (n <50) ou com o teste de Shapiro Wilks, os dados referentes ao halo de inibição foram ajustados para a distribuição normal (p<0,05) em todos os grupos, mesmo em alguns grupos os valores foram constantes entre as duas estatísticas (Persea americana as três concentrações e ambos os controles negativo e positivo), então foi necessário utilizar as estatísticas não paramétricas para a análise inferencial. Nos dois testes pôde ser demonstrado que a hipótese de pesquisa está cumprida; que existe um alto nível de inibição do extrato aquoso de Persea americana nas três concentrações e nas três vezes em que se consegue ter um efeito inibitório, entre muito sensível e super sensível, de acordo com a escala de Duraffourd. Uma vez realizado todo o processo de pesquisa, foi provado que o extrato, a 100% e às 72 horas, tinha uma auréola de inibição de 24 mm, superando o Padrão Ouro, que chega a 21 mm. Com base nas evidências estatísticas, foi determinado que a capacidade inibitória é importante contra Streptococcus Mutans, para o extrato de Persea americana a 100%, embora seja maior que o controle positivo.
