Resumen de Calidad y capacidad fertilizante in vitro de semen de toros Criollo Uruguayo criopreservado en dos diluyentes comerciales: Calidad del banco de semen de Bovinos Criollos Uruguayos

Yael Filipiak, Eileen Maria Armstrong Reborati, Rafael Aragunde, Danilo Fila, Jorge Alvaro Gil Laureiro, Valentina Alvarez, Marcos Pereira, Juan Carlos Boggio, Clara Larocca, Fernando Vila, S. Llambí

• español

  Evaluamos la calidad y capacidad fecundante in vitro (FIV) de semen de un banco de bovinos Criollo Uruguayo. Semen de 8 toros, diluido en Triladyl® (T) y Andromed® (A) (con/sin yema de huevo), se evaluó por CASA: concentración, motilidad, cinética, morfología y test hiposmótico. A las 2 horas se repitió motilidad y cinética. Se aplicó el test-T para tiempo y diluyentes y percentiles para categorizar los 16 grupos. Cuatrocientos cuatro complejos ovocito-células del cúmulo (COC) de calidad A, obtenidos de un frigorífico, fueron madurados en TCM con 5% de suero fetal bovino (SFB) y hormonas, en gotas, cubiertas con aceite mineral a 38,5ºC, 5% CO2 y humedad saturada; tras 22h se inseminaron con semen de 4 toros diluidos en A y T, seleccionado por centrifugación en gradientes de Percoll® (90/45%), en Talp-Sperm. Se formaron gotas con Talp-Fert con 2x106spz/ml y se coincubaron con los COC por 18h. Los presuntos cigotos se denudaron y cultivaron en CR1aa con SFB (5%). Se evaluó clivaje (48h) y desarrollo embrionario (DE) al día 7. Los resultados de la FIV se analizaron mediante Chi-cuadrado. No hubo diferencias significativas en el clivaje (A:143/207; T:128/197) ni en el DE (33.33 y 34.52% respectivamente) entre diluyentes. No hubo diferencias significativas en clivaje entre el semen del toro 1026 (73/109) y 9701 (68/101), ni entre ellos respecto a los toros 5834 (77/102) y 3733 (53/92), el 5834 tuvo mayor clivaje respecto al 3733 (p=0.008). No hubo diferencias significativas en DE entre toros. Salvo el toro 0850 (A y T), los demás resultaron aceptables y fueron fértiles en la prueba in vitro. Este trabajo estudió la calidad del semen del banco y su capacidad fertilizante in vitro, resultando adecuados ambos diluyentes. Salvo las muestras de semen de un toro, el resto podrían ser usadas para inseminación artificial u otras biotecnologías.

• English

  The quality andin vitrofertility (IVF) of semen fromthe Uruguayan Criollo cattle bank of the VeterinaryFaculty were evaluated. Semen from8 bulls, diluted in Triladyl®(T) and Andromed®(A) (with/without egg yolk)was evaluated by CASA: concentration, motility, kinetics, morphology and performed a hypoosmotic swelling test.After 2h motility and kinetics were repeated. Ttest for time and diluents was applied and percentiles to categorizethe 16 groups. 404 bovine Aquality oocytecumulus complexes (OCC) obtained fromovaries froma slaughterhouse,were matured in TCMwith 5 %BCS and hormones, in drops covered with mineral oil, at 38.5 ºC, 5 %CO2 andsaturated humidity. After 22h were inseminated with selected semen of 4 bulls in A and T, which was selected bycentrifugation in Percoll®gradients (90/45 %), in TalpSpermand adjusted with TalpFert to 2x106sperm/ml,drops covered with mineral oil were formed and placed the OCC inside, 18h. The zygotes were denuded and culturedin CR1aa with BCS (5 %). The cleavage (48h) and embryo development (ED) on day 7 (IETS standards), wereevaluated. Results were analyzed by Chi square. There were no significant differences in cleavage between diluents(A:143/207; T:128/197), nor ED (33.33 and 34.52 %respectively). There were no significant differences in cleavagebetween the 1026 (73/109) bull's semen and 9701 (68/101), nor between themand 5834 (77/102) and 3733 (53/92);although, 5834 had higher cleavage rate than 3733 (p= 0.008). There were no significant differences in ED betweenbulls. Except for bull 0850 (A and T), the others were acceptable and were fertilein vitrofrozen both in A and T.This work assessed the quality of the semen bank and itsin vitrofertilizing capacity. Both diluents resulted suitable.Except the semen samples fromone bull, the rest could be used for other reproductive biotechnologies.