Resumen de La tensión mecánica del citoesqueleto en estimula la adaptación las célulasTE-85 del osteosarcoma humano in vitro

Roberto S. Carvalho, Axel Bumann, James Scott, Edwin Yen

• español

  El citoesqueleto de los osteoblastos lo conforman tres grandes clases de proteínas : microfilamentos que contienen actina, microtúbulos que contie nen tubulina y filamento; intermedios que contienen vimentina. El propó sito de esta investigación fue el de estudiar el efecto de la tensión en la distr ibución de la actina, la vimentina y de las proteínas de contacto foca l vinculina, talina y tensina en células del tipo de los osteoblatos. Se cultivaron células TE-85 de osteosarcoma humano en DMEM/F-12 y se hicieron crecer hasta su confluencia en discos Flexercell Tipo 1. Se aplicaron fuerzas de tensión intermitentes a las células mediante un F-S U-S en períodos de 2, 6 y 24 horas y se utilizaron como contro l células que no recibían tensión. Se llevó a cabo la localización inmunocitoquími ca de la actina, vimentina , vinculina, talina y tensina tanto para los cultivos experimentales como para los contro les. También se llevaron a cabo controles negativos. Los resultados indican que la tens ión mecánica a lteró la distribución de las proteínas estudiadas. Aunque la tensión pareció alterar la distribución de la tensina a las 2 horas de la aplicación de la fuerza, la distribución de las otras proteínas estudiadas no cambió s ignificativamente hasta las 6 horas. Los cambios en la distribución de tanto la ta lina como la virrnlina mostraban un aumento de los contactos foca les después de la aplicación de la tensión. Sin embargo, en este estudio no se observó ningún cambio concluyente en la orientación de las células debido a la tensión.

  La respuesta de las células HOS a la tensión mecánica demuestra que el citoesqueleto se adapta a la tensión mediante la estimulación de recepto res y de proteínas específicas del citoesqueleto. Estos datos sugieren que las células pueden incrementar sus propiedades de anclaje a un substrato como resultado de la tensión .

• English

  The cytoskeleton of osteoblasts actively participates of cellular changes in size and shape upon the application of mechanical stimulation. Three main classes of proteins encompass the cytoskeleton of osteoblasts: micro fi lament> containing actin, microtubules containing tubu lin and interme diate f ilaments containing vimetin. The purpose of this invest igation was to study the effects of strain in the distribution of actin, vimetin and focal contact proteins vinculin, ta/in and tensin in osteoblast-like cells. Human osteosarcoma cells TE-85 were cultured in DMEM/F-12 and grown to confluency in Flexercell Type 1 dishes. lntermittent strain was applied to the cells using the Flexercell Strain Unit System for periods of 2, 6 and 24 hours and unstrained cells were used as controls. lmmunocytoc hemical loca lization fo r actin, vimetin, vinculin, talin and tensin for both experi metal and control cultures were undertaken. Negative controls were also performed. The results showed that mechanica l strain a ltered the distribution of ali proteins studied. A lthough strain appeared to alter distribution of tensin at 2 hours of stra in, the distribution of other proteins studied did not change significantly until 6 hours. The changes in distribution of both talin and vinculin indicated an increase of focal contacts after strain application. However, any changes in cell orientation due to strain in this study were inconclusive. The response of HOS cells to mechanical strain demostrat s that the cytoskeleton adapts to strain through the stimulation of spec ific and receptor proteins. These data suggest that cells may increase their substratum anchorage properties as a result of stra in.