Talavera de la Reina, España
Introducción: Los marcadores de remodelado óseo juegan un papel fundamental en el diagnóstico de la osteoporosis, y metátasis óseas, así como en la predicción del riesgo de fracturas y en la monitorización del tratamiento antiresortivo. La International Osteorporosis Foundation (IOF) junto con la International Federation of Clinical Chemistry (IFCC) recomiendan el uso de un biomarcador de formación ósea y otro de resorción. Entre los marcadores de resorción ósea ocupa un lugar clave el péptido C-terminal (CTX) del colágeno de tipo I. Uno de los ensayos más usados para este marcador reconoce un octapéptido conocido como b-crosslaps. En el presente estudio nos planteamos evaluar la influencia de las interferencias endógenas (hemólisis, ictericia, lipemia) en la determinación de estos péptidos mediante el método de electroquimioluminiscencia con el analizador cobas e-411 (ROCHE DIAGNOSTICS®).
Material y métodos: La determinación de los b-CTX se realiza mediante un inmunoensayo quimioluminiscente tipo sándwich en el que el analito se une a un anticuerpo monoclonal biotinilado, que liga a micropartículas magnéticas recubiertas de estreptavidina y un segundo anticuerpo marcado con un quelato de rutenio. El magnetismo de las partículas hace que el complejo formado se sitúe sobre la célula de medida, donde la aplicación de un potencial eléctrico produce luminiscencia en el rutenio. Se evaluó la influencia de interferencias endógenas (hemólisis, lipemia, ictericia) analizando repetidamente (n=15) una mezcla de sueros sin interferente y otra con máximas concentraciones de interferente (600 mg/dL de hemoglobina, 1625 mg/dL de triglicéridos y bilirrubina 30 mg/d) comparando las medias de cada grupo mediante el test de Wilcoxon. En los casos en que resultó una interferencia estadísticamente significativa se procedió a calcular el error en la medida causado por la interferencia a diferentes concentraciones de interferente obteniendo un interoferograma. Se utilizaron para los cálculos los programas EXCEL y MEDCALC 11.6.
Resultados: A las máximas concentraciones de interferente estudiadas se obtuvieron las siguientes medianas de concentración (en pg/mL) y significaciones estadísticas con el test no paramétrico de Wilcoxon, que figuran la tabla. Se considera que hay significación estadística con p<0.05.
Muestra basal Muestra con interferente p (significación) Hemólisis 1570 450 0.0001 Lipemia 414 417 0.266 Bilirrubina 414 399 0.1 Se procedió a la obtención del interferograma en el caso de la hemólisis, obteniendo la siguiente gráfica, demostrándose que existe interferencia (error>10%) para concentraciones de hemoglobina en el hemolizado superiores a 360 mg/dL, obteniéndose una disminución de la concentración de analito debida a la presencia de interferente.
Conclusiones: La hemólisis produce una interferencia negativa en la determinación de b-CTX, a partir de 360 mg/dL de hemoglobina en el hemolizado. No hay interferencia significativa debida a presencia de lipemia ni bilirrubina.
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