Detecciónes de la expresión de citoquinas mediante RT-PCR en tiempo real en ganado ovino

• Ana Cristina Pérez de Diego Camacho ^[1] ; Almudena Sánchez Matamoros ^[1] ; José Manuel Sánchez-Vizcaíno Rodríguez
  1. [1] Universidad Complutense de Madrid

     Universidad Complutense de Madrid

     Madrid, España

     
• Localización: Revista complutense de ciencias veterinarias, ISSN 1988-2688, Vol. 3, Nº. 2, 2009, págs. 129-138
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Cytokines gene expression detection by real time RT-PCR in sheep
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    Las citoquinas son moléculas proteicas secretadas por diferentes células, fundamentalmente del sistema inmunitario, como respuesta a una estimulación inmunológica. Existen diferentes técnicas para estudiar la producción y acción de éstas en los individuos. Este estudio consiste en la puesta a punto de una técnica de Retrotranscripción- Reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR) en tiempo real para la detección de la expresión del ARNm que codifica seis citoquinas (TNF-α, IFNγ, IL-4, IL2, IL-10, IL-12). Los resultados preliminares se obtuvieron tras la aplicación de la técnica a linfocitos estimulados in vitro con ConA (Concanavalina A) y LPS (Lipopolisacárido de E.coli) demostrando la detección de ARNm para IL-4, IL-2 e IFNγ y TNF-α, IL-12 e IL-10, respectivamente; posteriormente se realizó el estudio en ovejas inmunizadas frente a Chlamydophyla abortus, permitiendo la detección de la expresión de ARNm de las seis citoquinas. Estos resultados demuestran que es una técnica rápida, sensible y fiable para la detección de citoquinas.

  • English

    Cytokines are protein molecules that cells from the immune system secrete in response to immune stimulation. There are different techniques to study their production and their action on individuals. This study consists of the development of a real time RT-PCR method for the detection of the expression of mRNA coding for six cytokines (TNF-α, IFNγ, IL-4, IL2, IL- 10, IL-12). The preliminary results were obtained from the study of lymphocites stimulated with Con A and LPS, showing the detection of ARNm, IL-4, IL-2, IFNγ and TNF-α, IL-12, IL-10, respectively. Its subsequent application in sheep that were vaccinated against Chlamydophila abortus, allowed the detection of mRNA expression for the six cytokines.These results show that it is a swift, sensitive and reliable technique to detect mRNA of cytokines.