Las LDL nativas y modificadas alteran la morfología y la ultraestructura de las plaquetas humanas

• Localización: Clínica e investigación en arteriosclerosis, ISSN 0214-9168, ISSN-e 1578-1879, Vol. 12, Nº. 1, 2000, págs. 1-11
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Native and modified LDL induce alterations in the morphology and ultrastructure of human platelets
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• Resumen
  • español

    Objetivo. En el presente estudio se ha investigado los efectos causados por las LDL nativas, mínimamente modificadas y oxidadas sobre la morfología y ultraestructura plaquetaria.

    Metodos. Mediante un nuevo procedimiento analítico, las plaquetas presentes en plasmas ricos (PRP) de individuos normolipémicos fueron aisladas utilizando filtros de membranas no reactivas de polivinilpirrolidona montados en cámaras Swinex-25. Posteriormente, los cambios morfológicos y ultraestructurales causados por los diferentes agentes estimuladores fueron evaluados mediante microscopia electrónica de rastreo (MER) y de transmisión (MET).

    Resultados. En nuestras condiciones experimentales, las plaquetas en estado de reposo, es decir, no estimuladas por ningún agonista, presentaron una completa integridad en todas sus áreas y regiones principales. Por contra, la estimulación con trombina a bajas concentraciones (0,01 U/ml) permitió observar la existencia de un estado de activación transicional, mientras que a concentraciones superiores (0,1 U/ml) el mismo agonista produjo intensos cambios morfológicos y ultraestructurales. El efecto de las lipoproteínas fue dependiente del tipo de partícula. Las LDL nativas (0,5 g de proteína/l) causaron una rápida transición de las típicas formas de reposo a un estado de uniformidad morfológica caracterizado por la pérdida del contorno liso de la superficie plasmática y la adopción de formas redondeadas con emisión de pequeños seudópodos. El estudio de la ultraestructura plaquetaria permitió observar la existencia de moderada centralización granular, dilución del contenido de los gránulos, desorganización microtubular y fusión saculocanalicular. Las LDL mínimamente modificadas (0,1 g de proteína/l) causaron intensos efectos citotóxicos sobre las membranas plasmáticas. Por otra parte, los cambios morfológicos y ultraestructurales inducidos por este tipo de partículas fueron más intensos que los producidos por las LDL nativas. Finalmente, las LDL oxidadas (0,1 g de proteína/l) causaron profundos cambios morfológicos y ultraestructurales, caracterizados por emisión de seudópodos, vacuolización, centralización granular, pérdida de organelas, conexiones entre el sistema canalicular abierto y el sistema tubular denso y desorganización microtubular. Sin embargo, las LDL oxidadas apenas presentaron efectos citotóxicos.

    Conclusión. Nuestros resultados demuestran por primera vez que en condiciones in vitro las LDL, tanto nativas como mínimamente modificadas u oxidadas, son capaces de inducir intensos cambios morfológicos y ultraestructurales en las plaquetas humanas, lo que apoya la hipótesis del papel trombomodulador de las LDL.

  • English

    Objective. We have investigated the effects of native and modified LDL (minimally modified and oxidized LDL) on platelet morphology and ultrastructure.

    Methods. Platelets from normocholesterolemic subjects were isolated by a new noncentrifugative method combined with scanning and transmission electron microscopy.

    Results. Under our experimental conditions, the morphology of resting platelets was fully preserved. On the other hand, thrombin at low concentrations (0.01 U/ml) induced a transitional platelet activated state, whereas at higher concentrations (0.1 U/ml) it caused profound changes in the morphology and the ultrastructure of platelets. The effect of LDL particles (native and modified) on the functional morphology of human platelets was investigated by means of transmission and scanning electron microscopy. Platelets stimulated by native LDL (0.5 g/l), showed disc-sphere transformation with pseudopodia and centralization of granules. A cytodamage in platelet membrane was induced by minimally modified LDL (0.1 g/l), leading to a lower electron density of cytoplasm compared to control platelets. Furthermore, centralization of granules and significant changes in the morphology and ultrastructure of platelets were observed. Finally, oxidized LDL at a concentration of 0.1 g/l induced more obvious functional morphological alterations of platelets than those caused by native and minimally modified LDL.

    Conclusion. Our results demonstrate for the first time fhart in vitro both native and minimally modified or oxidized LDL are able to induce profound morphological and ultrastructural changes in human platelets, thus supporting a thrombomodulator role for LDL.