Identification of proteins in Sporothrix schenckii sensu stricto in response to oxidative stress induced by hydrogen peroxide

• Estela Ruíz Baca ^[2] ; Hylda Leiva Sánchez ^[2] ; Bertha Calderón Barraza ^[2] ; Ulises Esquivel Naranjo ^[1] ; Everardo López Romero ^[3] ; Angélica López Rodríguez ^[2] ; Mayra Cuéllar Cruz ^[3]
  1. [1] Universidad Autónoma de Querétaro

     Universidad Autónoma de Querétaro

     México

     
  2. [2] Facultad de Ciencias Químicas. Universidad Juárez. Durango. México
  3. [3] Departamento de Biología. Universidad de Guajanuato. México

  Mostrar afiliaciones +
• Localización: Revista Iberoamericana de Micología, ISSN 1130-1406, Vol. 36, Nº. 1, 2019, págs. 17-23
• Idioma: inglés
• Títulos paralelos:
  • Identificación de proteínas en Sporothrix schenckii sensu stricto en respuesta al estrés oxidativo inducido por peróxido de hidrógeno
• Enlaces
  • Texto completo
• Resumen
  • español

    Antecedentes La esporotricosis es una infección fúngica causada por el complejo Sporothrix schenckii. Para colonizar al huésped, los patógenos deben neutralizar las especies reactivas de oxígeno producidas por las células fagocíticas durante el estallido respiratorio. Poco se conoce sobre este mecanismo en S. schenckii.

    Objetivos Identificar proteínas diferencialmente expresadas durante la exposición de S. schenckii sensu stricto a diferentes concentraciones de H2O2.

    Métodos Levaduras de S. schenckii sensu stricto fueron expuestas a concentraciones crecientes de H2O2. Las proteínas diferencialmente expresadas en respuesta el estrés oxidativo fueron analizadas mediante electroforesis en geles de poliacrilamida en doble dimensión (2D-PAGE) e identificadas por MALDI-MS/MS. Se realizaron ensayos de RT-PCR para evaluar la transcripción de genes de las proteínas identificadas.

    Resultados Concentraciones altas de H2O2 (800 mM) permitieron el crecimiento celular, y se seleccionaron las concentraciones de 200 y 400 mM para el análisis comparativo mediante 2D-PAGE. Este análisis reveló al menos cinco proteínas diferencialmente expresadas, identificadas como proteína de choque térmico de 70 kDa (Hsp70), chaperonina GroEL, factor de alargamiento 1-β (EF1-β), una proteína hipotética y peroxirredoxina mitocondrial (Prx1). La RT-PCR reveló que la transcripción de los genes que codifican para algunas de estas proteínas se regula diferencialmente.

    Conclusiones Con estos resultados pensamos que estas proteínas podrían estar involucradas en la resistencia de S. schenckii sensu stricto al estrés oxidativo y jugar un papel importante en la supervivencia del hongo en el huésped.

  • español

    Background Sporotrichosis is a fungal infection caused by the Sporothrix schenckii complex. In order to colonize the host, the pathogen must neutralize the reactive oxygen species produced by the phagocytic cells during the respiratory burst. Little is known about these mechanisms in S. schenckii.

    Aims To identify the proteins differentially expressed after the exposure of S. schenckii sensu stricto to different concentrations of H2O2.

    Methods Yeast cells of S. schenckii sensu stricto were exposed to increasing concentrations of H2O2. Proteins differentially expressed in response to oxidative stress were analyzed using two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2D-PAGE) and identified by MALDI-MS/MS. RT-PCR assays were performed to evaluate the transcription of genes of the identified proteins.

    Results Concentrations of H2O2 as high as 800 mM allowed cell growth, and 200 mM and 400 mM were selected for comparative analysis by 2D-PAGE. This analysis revealed at least five differentially expressed proteins, which were identified as heat shock 70 kDa protein (Hsp70), chaperonin GroEL, elongation factor 1-β (EF1-β), a hypothetical protein, and mitochondrial peroxiredoxin (Prx1). RT-PCR revealed that the transcription of the genes coding for some of these proteins are differentially regulated.

    Conclusions Based on these results, it is proposed that these proteins may be involved in the resistance of S. schenckii to oxidative stress, and play an important role in the fungus survival in the host.