Cultivo y diferenciación in vitro de células mesenquimales de pulpa dentaria humana hacia el linaje odontogénico-osteogénico en matrices tridimensionales de Colágeno Tipo I

• Camejo Suárez, Ma. V. ^[1] ; Merentes Díaz, E. ^[1]
  1. [1] Universidad Central de Venezuela

     Universidad Central de Venezuela

     Venezuela

     
• Localización: Acta odontológica venezolana, ISSN 0001-6365, Vol. 53, Nº. 3, 2015, págs. 1-2
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Cultivation and differentiation in vitro of mesenchymal cells of human dental pulp into odontogenic-osteogenenic lineage in tridimensional matrices of collagen Type I
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• Resumen
  • español

    Las células madre adultas tienen un gran potencial, para ser utilizadas en la terapia celular y la ingeniería de tejidos. El objetivo del presente trabajo de investigación es determinar la capacidad de diferenciación in vitro de las células madre mesenquimales adultas de la pulpa dentaria humana hacia el linaje odontogénico-osteogénico, con el uso de factores inductores en el medio (10 mM β-GP, 10-8 M dexametasona y 50 μg/mL ácido L-ascórbico) y una matriz tridimensional de colágeno natural tipo I, preparada a partir de cola de rata. Para aislar las células, se utilizó el método de disgregación enzimática. Fueron cultivadas en medio DMEM-F12 suplementado con 15% de SFB, 100 μM L-ácido ascórbico 2-fosfato, 2 mM L-glutamina y antibióticos-antimicótico. Células de 1 línea celular (1 paciente), se sembraron en matrices de gel de colágeno, de dos maneras: 1) Inmersas en la matriz natural de colágeno tipo I, y 2) Sobre la matriz natural de colágeno tipo I. Los resultados mostraron diferencias en las características morfológicas de las células sembradas inmersas y sobre la matriz, sin embargo, algunas células cambiaron hacia una morfología semejante a odontoblastos, se observó la expresión de la DSP y la formación de depósitos calcificados Rojo Alizarina “positivos”, sugerentes a una diferenciación odontoblástica en ambos métodos, especialmente a los veintiún días de la inducción. Las células mesenquimales de la pulpa dentaria humana aisladas e inducidas a la diferenciación odontogénica-osteogénica en sustrato tridimensional (matriz de colágeno) lograron diferenciarse en células semejantes a odontoblastos.

  • English

    Adult stem cells have great potential, to be used in cell therapy and tissue engineering. The objective of this research work is to determine the ability of in vitro differentiation of mesenchymal stem cells from adult human dental pulp into odontogenic –osteogenic lineage , with the use of inductors factors in the medium (10 mm β-GP, 10-8 M dexamethasone and 50 μg/ml L-ascorbic acid) and a three-dimensional matrix of natural collagen type I, prepared from a rat tail. To isolate the cells, we used the method of unbundling enzyme. They were cultured in DMEM-F12 medium supplemented with 15% FBS, 100 μm L-ascorbic acid 2-phosphate, 2 mm L-glutamine and antibiotic-antimycotic. Cells of 1 cell line (1 patient), were planted in arrays of collagen gel, in two ways: 1) immersed in the natural matrix of collagen type I and 2) on the natural matrix of collagen type I. The results showed differences in the morphological characteristics of the cells seeded immersed and on the array, however, some cells changed toward a morphology similar to odontoblasts, we observed the expression of the DSP and the formation of calcified deposits alizarin red "positive", suggesting a differentiation odontoblastic in both methods, especially to the twenty-one days of the induction. The mesenchymal cells of the isolated human dental pulp and induced to differentiate odontogenic-osteogenenic in dimensional substrate (collagen matrix) achieved differentiate into cells similar to odontoblasts.