Resumen de Obtención de embriones en fase cotiledonar de Café Robusta (Coffea canephora) con el empleo de un sistema de inmersión temporal, mediante la técnica de embriogénesis somática a partir de segmentos foliares

Gabriel Paredes, Cristian Peña, Mónica Jadán

• español

  En el presente trabajo se llevó a cabo la estandarización de la fase de establecimiento, en donde la concentración de cloro 1.5 % y una inmersión de 20 minutos, resultó ser efectiva en cuanto a bajos porcentajes de contaminación y oxidación. Para la fase de inducción de callo se utilizó el medio M&S (Murashige & Skoog) con 3 % de sacarosa y 7 % de agar, con diferentes concentraciones de 2,4-D (ácido-2,4- diclorofenilacético), BAP (bencilaminopurina) y KIN (Kinetina); el mejor medio resultó ser: M&S adicionado con 0.5 mgL-1 de 2,4-D y 2 mgL-1 de KIN. Los embriones se desarrollaron en medio M&S a la mitad de la concentración sin reguladores de crecimiento; dicho medio se probó también en forma líquida en tarrinas (sistema de inmersión casero) y en un sistema de inmersión temporal automatizado (SIT), en donde el primero mostró crecimiento de embriones ya que a los 20 días se visualizaron embriones en estado globular y a las 12 semanas de cultivo se lograron obtener 611 embriones, de los cuales 15 presentaron el estado cotiledonar. El Sistema de Inmersión Temporal automatizado no mostró resultado alguno.

• English

  Standard methods were developed to obtain cotyledon-stage embryos of Coffea canephora in the laboratory. The stablishment phase was standardized using a chlorine concentration of 1.5 % and 20 minutes immersion time. This method was effective because it reduced contamination and produced low percentages of oxidation. In the callus induction phase, the medium used was M&S (Murashige & Skoog) with saccharose (3 %) and agar (7 %). We tested different concentrations of 2,4-D (2,4- dichlorophenilacetic acid), BAP (benzylaminopurine) and KIN (kinetin). The best medium was: M&S with 0.5 mg/L of 2,4-D and 2 mg/L of KIN. The embryos were grown in M&S medium at half strength without growth regulators. This medium was also tested as a liquid in large tubs in two systems, the home immersion system and Automated Temporary Immersion System (TIS). There was embryo growth after 20 days in the home inmmersion system. We produced globular stage embryos in the system and after 12 weeks we had 611 embryos, 15 of these embryos were in the cotyledon stage. The automated temporary immersion system did not produced embryos.