Utilización de marcadores ITS e ISSR para la caracterización molecular de cepas híbridas de "Pleurotus djamor"

• Autores: Leticia Aguilar Doroteo, Paola Berenice Zárate Segura, Ramón Villanueva Arce, Jorge L. Yáñez Hernández, María Eugenia Garín Aguilar, Paula Cecilia Guadarrama Mendoza, Gustavo Valencia del Toro
• Localización: Revista Iberoamericana de Micología, ISSN 1130-1406, Vol. 35, Nº. 1, 2018, págs. 49-55
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • Use of ITS and ISSR markers in the molecular characterisation of "Pleurotus djamor" hybrid strains
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    Antecedentes La caracterización molecular de cepas silvestres de Pleurotus es importante para la conservación del germoplasma y su posterior uso en la mejora genética. No se han realizado estudios moleculares con los monocariontes utilizados para la producción de cepas híbridas, ni de las cepas reconstituidas obtenidas al aparear tales monocariontes. Por consiguiente, la caracterización molecular de cepas dicarióticas parentales, híbridas y reconstituidas, así como de cepas monocarióticas, es de suma importancia.

    Objetivos Caracterizar molecularmente cepas dicarióticas silvestres e híbridas, así como cepas monocarióticas de Pleurotus djamor.

    Métodos Se recolectaron cinco cepas silvestres de P. djamor en diferentes estados de México y se identificaron molecularmente mediante la secuenciación de la región ITS1-5.8-ITS2 con los oligonucleótidos universales ITS1 e ITS4. Se seleccionaron dos cepas silvestres y se generaron cuatro cepas híbridas por apareamiento de neohaplontes compatibles. Para la caracterización molecular de las cepas monocarióticas y dicarióticas seleccionadas y producidas se utilizaron seis marcadores ISSR.

    Resultados Con los marcadores ITS se obtuvo un producto de amplificación de 700 pb en las cinco cepas silvestres con una similitud del 99-100% con la especie P. djamor. Con los marcadores ISSR se obtuvieron un total de 95 fragmentos con un 99% de polimorfismo.

    Conclusiones Las cepas silvestres se identificaron como P. djamor. Los marcadores ISSR generaron bandas polimórficas en las cepas monocarióticas y dicarióticas, y separaron ambos tipos de cepas. El alto grado de polimorfismo indica la diversidad genética de P. djamor, una ventaja para la producción de hongos y para la mejora de la especie.

  • English

    Background Molecular characterisation of wild type Pleurotus species is important for germplasm conservation and its further use for genetic improvement. No molecular studies have been performed with monokaryons used for producing hybrid strains, either with the reconstituted strains obtained by pairing those monokaryons. The molecular characterisation of parental dikaryons, hybrid, and reconstituted strains as well as monokaryotic strains, is therefore of utmost importance.

    Aims To carry out the molecular identification of Pleurotus djamor strains, i.e. dikaryotic wild type strains, hybrid strains, and the monokaryotic strains used for the hybrid formation.

    Methods Five wild type strains of P. djamor from different states in Mexico were collected and molecularly identified by sequencing the ITS1-5.8-ITS2 region using ITS1 and ITS4 universal oligonucleotides. Four hybrid strains were obtained by pairing neohaplonts of two wild type strains selected. Six ISSR markers were used for the molecular characterisation of monokaryotic and dikaryotic strains.

    Results Using the ITS markers, an amplified product of 700bp was obtained in five wild type strains, with a 99-100% similarity with P. djamor. A total of 95 fragments were obtained using the ISSR markers, with 99% of polymorphism.

    Conclusions Wild type strains were identified as P. djamor, and were clearly grouped with Mexican strains from other states of Mexico. ISSR markers allowed the generation of polymorphic bands in monokaryotic and dikaryotic strains, splitting both types of strains. The high degree of polymorphism indicates the genetic diversity of P. djamor, an advantage in mushroom production and in the improving of the species.