Objetivo: Las moléculas B7 son una familia de proteínas que coestimulan al linfocito T durante la activación inmunitaria, normalmente las células epiteliales corneales (CEC) no expresan estas moléculas en superficie. Los receptores tipo Toll juegan un papel importante en la respuesta inmune innata hacia patógenos invasores y recientemente se demostró su expresión en córneas de ratón. El objetivo del presente estudio fue determinar si la infección viral induce moléculas B7 y TLR9 en CEC humanas. Métodos: Las CEC fueron obtenidas de corneas humanas tratadas con dispasa II y crecidas en presencia de medio hormonal epitelial suplementado hasta su confluencia. Posteriormente las células fueron infectadas con adenovirus 5 (Ad5) y cultivadas a diferentes tiempos. Las CEC fueron recuperadas y marcadas contra CD80, CD86, TLR-9 y citoqueratina. Todas las células fueron analizadas por citometría de flujo. Resultados: La infección de CEC con Ad5 indujo la expresión de moléculas B7 y TLR-9 desde las 24 h, alcanzando su máximo nivel a las 72 h. La expresión de moléculas B7 a las 72 h fue como sigue, expresión de CD80 en CEC infectadas 62% error estándar (ES) 2.6 versus 3 ES 1.2 (p < 0,001) en CEC no infectadas; expresión de CD86 en CEC infectadas 95% ES 2.1 versus 5% ES 1.2 (p < 0,001) en CEC no infectadas. La expresión de TLR-9 a las 72 h fue de 80% ES 1.2 en CEC infectadas versus 5% ES 1 en CEC no infectadas (p < 0,001). Conclusiones: La infección por Ad5 induce la expresión de moléculas B7 y TLR-9 en CEC.
Purpose: B7 molecules are a family of proteins that co-stimulate T cells during immune activation. Normally the corneal epithelial cells (CEC) do not express these molecules on their cell surface. Toll-like receptors play an important role in the innate immune response to invading pathogens and recently have been demonstrated to be expressed on mice cornea. The objective of this study was to determine whether adenoviral infection induces B7 molecules and TLR9 on human CEC. Methods: CEC were isolated from human corneas treated with dispase-II, and grown in the presence of supplemented hormonal epithelial medium until confluence. Then CEC were then infected with adenovirus 5 (Ad5) and cultured for different times. The CEC were then recovered and stained against human CD80, CD86, TLR-9 and cytokeratin. All cells were analyzed by flow cytometry. Results: Ad5 infection of CEC induced the expression of B7 molecules and TLR-9 after 24 hours in culture, rising to maximum levels at 72 hours. B7 expression at 72 hours was as follows: CD80 expression on infected CEC was 62% (standard error [SE] 2.6) versus 3% (SE 1.2) on non-infected CEC (p<0.001); CD86 expression on infected CEC was 95% (SE 2.1) versus 5% (SE 1.2) on non-infected CEC (p<0.001). TLR-9 expression at 72 hours was 80% (SE 1.2) on infected CEC versus 5% (SE 1) on non-infected CEC (p<0.001). Conclusions: Ad5 infection induced the expression of B7 molecules and TLR-9 on CEC.
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