Mercury exposure induces proinflammatory enzymes in vascular fibroblasts

• Autores: Alberto Millán Longo, Óscar Montero Sáiz, Claudia Sarró Fuente, Andrea Aguado Martínez, Mercedes Salaices Sánchez
• Localización: Clínica e investigación en arteriosclerosis, ISSN 0214-9168, ISSN-e 1578-1879, Vol. 29, Nº. 6, 2017, págs. 231-238
• Idioma: español
• Títulos paralelos:
  • La exposición a mercurio induce la expresión de enzimas pro-inflamatorias en fibroblastos vasculares
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• Resumen
  • español

    Introducción Estudios previos muestran que la exposición a mercurio aumenta el riesgo cardiovascular, sin embargo, los mecanismos celulares subyacentes no han sido esclarecidos completamente. Nuestro objetivo es estudiar el efecto de la exposición a HgCl2 sobre la expresión de enzimas involucradas en la síntesis de prostanoides y especies reactivas de oxígeno (ROS) en fibroblastos vasculares (FV). Se ha demostrado la participación de estas moléculas en la respuesta inflamatoria asociada a enfermedades cardiovasculares.

    Métodos FV de la adventicia de aorta de ratas Sprague-Dawley, caracterizados por inmunofluorescencia como negativos para α-actina, fueron estimulados con HgCl2 (0,05-5 μg/ml) durante 48 horas. Se analizaron los niveles de ciclooxigenasa-2 (COX-2), prostaglandina E sintasa 1 microsomal (mPGES-1), tromboxano A2 sintasa (TXAS), NADPH oxidasa 1 (NOX-1) y 4 (NOX-4) mediante qRT-PCR y western blot, respectivamente. La actividad de NOX se determinó mediante quimioluminiscencia.

    Resultados La exposición a HgCl2 aumentó la expresión de COX-2, mPGES-1, TXAS y NOX-1, disminuyendo la expresión de NOX-4. El tratamiento con inhibidores de COX-2 (10 μM celecoxib) y NOX (300 μM apocynin, 0.5 μM ML-171) abolió el aumento de la expresión de NOX-1 y COX-2, respectivamente.

    Conclusiones 1) HgCl2 aumenta la expresión de enzimas proinflamatorias implicadas en la síntesis de ROS y prostanoides en FV. 2) Hay una regulación recíproca entre las vías de COX-2 y NOX-1. 3) Estos efectos pueden contribuir a explicar el aumento del riesgo cardiovascular asociado a la exposición al mercurio.

  • English

    Introduction Previous studies show that mercury exposure increases cardiovascular risk, although the underlying cellular mechanisms have still not been fully studied. The aim of this project is to study, in vascular fibroblasts (VF), the effect of HgCl2 exposure on the expression of enzymes involved in the synthesis of prostanoids and reactive oxygen species (ROS). These molecules have been shown to participate in the inflammatory response associated with cardiovascular diseases.

    Material and methods Adventitial VF cultures of Sprague-Dawley rat aortas, shown to be α-actin negative by immunofluorescence, were exposed to HgCl2 (0.05–5 μg/mL) for 48 h. mRNA and protein levels of cyclooxygenase-2 (COX-2), microsomal prostaglandin E synthase 1 (mPGES-1), thromboxane A2 synthase (TXAS), NADPH oxidase 1 (NOX-1), and 4 (NOX-4) where analyzed using qRT-PCR and western blot, respectively. NOX activity was determined by chemiluminescence.

    Results HgCl2 exposure increased COX-2, mPGES-1, TXAS, and NOX-1 expression and NOX activity, and decreased NOX-4 expression. The increase in NOX-1 and COX-2 expression was abolished by the treatment with inhibitors of COX-2 (10 μM celecoxib) and NOX (300 μM apocynin, 0.5 μM ML-171).

    Conclusions 1) HgCl2 increases the expression of pro-inflammatory enzymes involved in ROS and prostanoid synthesis in VF. 2) There is a reciprocal regulation between COX-2 and NOX-1 pathways. 3) These effects can contribute to explain the increase in cardiovascular risk associated to mercury.