Expression ofrecombinant Cry 1Ac protein in potato plant cell suspension culture:: Establishment of culture and optimization of biomass and protein production by nitrogen supply

• Carlos Julio Nova-López ^[1] ; Jorge Mario Muñoz-Pérez ^[1] ; Luisa Fernanda Granger-Serrano ^[1] ; Mario Evelio Arias-Zabala ^[1] ; Rafael Eduardo Arango-Isaza ^[1]
  1. [1] Universidad Nacional de Colombia

     Universidad Nacional de Colombia

     Colombia

     
• Localización: DYNA: revista de la Facultad de Minas. Universidad Nacional de Colombia. Sede Medellín, ISSN 0012-7353, Vol. 84, Nº. 201, 2017, págs. 34-41
• Idioma: inglés
• Títulos paralelos:
  • Expresión de la proteína recombinante Cry1Ac en cultivos de células de papa en suspensión:: Establecimiento del cultivo y optimización de la producción de la biomasa y la proteína mediante la adición de nitrógeno
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• Resumen
  • español

    Los cultivos in vitro de células vegetales en suspensión se han propuesto como plataformas alternativas de expresión de proteínas recombinantes con aplicación terapéutica por las ventajas que ofrecen sobre los sistemas tradicionales de expresión en células bacterianas y de mamíferos. En este trabajo se determinó un protocolo para el establecimiento de suspensiones de papa (S. tuberosum) genéticamente modificadas con el gen de la proteína Cry 1Ac y se caracterizaron las cinéticas de producción de la biomasa y la proteína recombinante. Los entrenudos y el medio MS suplementado con 2.0 mg L-1 de 2,4-D, mostraron los mejores porcentajes de formación de callo. La tasa máxima de crecimiento específico calculada para las suspensiones fue 0.12 d-1, con una concentración máxima de biomasa de 1.41 gL-1 al final de la fase exponencial, la cual logró aumentarse hasta 3.94g L-1 duplicando la concentración deNO3-y NH4+en el medio de cultivo.

  • English

    Plant cell suspension cultures have been proposed as alternative platformsfor the expression of recombinant proteins with therapeutic application because of its potential advantages over traditional bacterial and mammalian cells-based platforms. In this work, a protocol for the establishment of potato suspensions (S. tuberosum) genetically modified with Cry 1Acgene was obtained and the kinetics of biomass and recombinant protein production were characterized. Internodal explants and MS medium supplemented with 2.0 mg L-1of 2,4-D showed the best response in terms of callus formation. The maximum specific growth rate for suspensions was 0.12 d-1, with a maximum biomass concentration of 1,41 g L-1at the end of exponential phase. This biomass concentration was improved to 3.94 g L-1bydoubling the concentration of NO3-and NH4+in the culture medium.