Genotipificación y perfil bioquímico de aislados de xanthomonas albilineans en Venezuela

• Autores: Beatriz Alvez, Guillermina Alonso, Maira Oropeza
• Localización: Interciencia: Revista de ciencia y tecnología de América, ISSN 0378-1844, Vol. 41, Nº. 11, 2016, págs. 732-739
• Idioma: español
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• Resumen
  • español

    La bacteria Xanthomonas albilineans es el agente causal de la escaldadura foliar en caña de azúcar, y se caracteriza por presentar gran variabilidad en su morfología celular, perfil bioquímico y perfil genético, características clave para su identificación.

    Para diagnosticar a tiempo la infección y evitar pérdidas de gran magnitud, deben establecerse protocolos de identificación del fitopatógeno y evaluar el grado de diversidad genética.

    En este trabajo se pretende caracterizar aislados venezolanos de X. albilineans mediante pruebas microbiológicas, bioquímicas y moleculares. Para ello se aislaron bacterias de plantas de caña de azúcar variedades V756, V781 y V99245 con síntomas de escaldadura foliar y se sometieron a crecimiento diferencial en medios selectivos, tinción de Gram, hidrólisis de esculina, almidón y gelatina, actividad catalasa y oxidasa. Además, se realizó el análisis molecular mediante amplificación del ADN con iniciadores específicos y análisis ERIC-PCR y REP-PCR. El crecimiento diferencial y los perfiles bioquímicos de los aislados venezolanos LMV02 y LMV08 coinciden con la cepa control de X. albilineans. La amplificación del ADN con iniciadores específicos permitió obtener la banda específica de 288 pb aunque igualmente se obtuvieron otras bandas. Con el análisis de los dendrogramas obtenidos con ERIC-PCR y REP-PCR se observó que los aislados presentan una similitud de 50 y 30%, respectivamente.

    La estrategia de diagnóstico empleada permitió corroborar la identidad de los aislados LMV02 y LMV08 como la bacteria patógena X. albilineans, así como evaluar su relación génica

  • English

    Xanthomonas albilineans, the causal agent of leaf scald in sugarcane, is characterized by a great variability in its cellular morphology, biochemical and genetic profiles, which are key characteristics in its identification. To achieve the early diagnosis of this disease and to avoid losses of great magnitude, identification protocols should be established for the plant pathogen and its genetic diversity must be assessed. This paper aims to characterize isolated Venezuelan X. albilineans strains by microbiological, biochemical and molecular tests. Bacteria isolated from sugarcane plants cultivars V756, V781 and V99245 with leaf scald symptoms were subjected to differential growth on selective media, Gram staining, hydrolisis of starch, esculinand gelatin and, catalase and oxidase activity. In addition, molecular analysis was performed using DNA amplification with specific primers, as well as ERIC-PCR and REP-PCR analysis.

    The differential growth and biochemical profiles of Venezuelan isolates LMV08 and LMV02 match the X. albilineans control strain. DNA amplification with specific primers yielded the 288 bp specific band but other bands were obtained as well.

    With the analysis of dendrograms obtained with ERIC-PCR and REP-PCR, we observed that the isolates have a similitude of 50 and 30%, respectively. The diagnostic strategy employed corroborated the identity of LMV08 and LMV02 as X. albilineans, and also assessed their genetic relationship.

  • português

    A bactéria Xanthomonas albilineans é o agente causal da escaldadura das folhas da cana-de-açúcar, e se caracteriza por apresentar grande variabilidade na sua morfologia celular, perfil bioquímico e perfil genético, características chave para sua identificação. Para diagnosticar de forma precoce a afecção e evitar perdas de grande magnitude, devem estabelecer-se protocolos de identificação do fitopatógeno e avaliar o grau de diversidade genética. Neste trabalho se pretende caracterizar isolados venezuelanos de X. albilineans mediante provas microbiológicas, bioquímicas e moleculares. Para isto foram isoladas bactérias de plantas de cana-de-açúcar nas variedades V756, V781 e V99245 com sintomas de escaldadura foliar e se submeteram a crescimento diferencial em meios seletivos, coloração de Gram, hidrólise de esculina, amido e gelatina, atividade catalase e oxidase. Além disso, se realizou a análise molecular mediante amplificação do DNA com iniciadores específicos e análise ERIC-PCR e REP-PCR. O crescimento diferencial e os perfis bioquímicos dos isolados venezuelanos LMV02 e LMV08 coincidem com a cepa de referência de X. albilineans. A amplificação do DNA com iniciadores específicos permitiu obter a banda específica de 288 pb, embora também foram obtidas outras bandas. Com a análise dos dendrogramas obtidos com ERIC-PCR e REP-PCR se observou que os isolados apresentam uma semelhança de 50 e 30%, respectivamente. A estratégia de diagnóstico empregada permitiu corroborar a identidade dos isolados LM.