Characterization of the c-terminal domain of protein kinase g of mycobacterium tuberculosis

• Autores: Rossana Jaspe, Elba Guerrero, Leiria Salazar
• Localización: Interciencia: Revista de ciencia y tecnología de América, ISSN 0378-1844, Vol. 37, Nº. 8, 2012, págs. 608-613
• Idioma: inglés
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• Resumen
  • español

    Mycobacterium tuberculosis utiliza varias estrategias para evadir la respuesta inmune. Se ha sugerido que la secreción de la proteína serina quinasa G (PknG) inhibe la fusión fagosoma-lisosoma, lo que permite la supervivencia de las micobacterias en el macrófago. La proteína PknG de M. tuberculosis posee, además del dominio quinasa, dos motivos tioredoxina (Trx) y un motivo tetratricopéptido sencillo (TPR). En este trabajo se construyó una mutante de PknG de M. tuberculosis PknG (M. tuberculosis pknGΔCt:: hyg) por interrupción de la región C-terminal del gen pknG. No se observó diferencias significativas durante la fase exponencial de crecimiento de las cepas mutante y parental. Sin embargo, la supervivencia de la cepa mutante fue mucho menor que la mostrada por la cepa de tipo salvaje durante la fase estacionaria.

    Este fenotipo no pudo ser complementado por la proteína PknG silvestre, probablemente debido a la acumulación de la proteína mutante PknGΔCt en la célula bacteriana. También se observó alteración de la morfología de las colonias de la cepa mutante. Por último, utilizando un sistema de dos híbridos bacterianos, se observó que el dominio C-terminal de PknG está involucrado en su dimerización y en las interacciones con su sustrato

  • English

    Mycobacterium tuberculosis uses several strategies to evade the innate immune response. It has been suggested that the secretion of serine protein kinase G (PknG) inhibits the phagosome-lysosome fusion, allowing the survival of the mycobacteria.

    The protein PknG of M. tuberculosis harbor, in addition to the kinase domain, two thioredoxin (Trx) motifs and one tetratricopeptide (TPR) motif. In this work a M. tuberculosis PknG mutant (M. tuberculosis pknGΔCt::hyg) was constructed which has an interruption at the C-terminal region of pknG gene. No significant difference was observed during the exponential growth phase between the mutant and parental strains.

    However, survival of the mutant strain was much lower than that shown by the wild type strain during the stationary phase.

    This phenotype could not be complemented by the wild type PknG, probably due to the accumulation of the PknG∆Ct mutant protein in the bacterial cell. Alteration of colony morphology in the mutant strain was also observed. Finally, using a bacterial two-hybrid system, the C-terminal domain of PknG was shown to be involved in its dimerization and interactions with its substrate.

  • português

    Mycobacterium tuberculosis utiliza várias estratégias para evadir a resposta imune. Tem sido sugerido que a secreção da proteína serina quinase G (PknG) inibe a fusão fagosoma- -lisosoma, o que permite a sobrevivência das micobactérias no macrófago. A proteína PknG de M. tuberculosis possui, além do domínio quinase, dois motivos tioredoxina (Trx) e um motivo tetratricopéptide simples (TPR). Neste trabalho se construiu um mutante de PknG de M. tuberculosis PknG (M. tuberculosis pknGΔCt:: hyg) por interrupção da região C-terminal do gen pknG. Não se observou diferenças significativas durante a fase exponencial de crescimento das cepas mutante e parental. No entanto, a sobrevivência da cepa mutante foi muito menor que a mostrada pela cepa de tipo selvagem durante a fase estacionaria.

    Este fenótipo não pode ser complementado pela proteína PknG silvestre, provavelmente devido à acumulação da proteína mutante PknGΔCt na célula bacteriana. Também se observou alteração da morfologia das colônias da cepa mutante.

    Por último, utilizando um sistema de dois híbridos bacterianos, se observou que o domínio C-terminal de PknG está envolvido em sua dimerização e nas interações com seu substrato.