Caracterización molecular de genes cry1, cry2, cry3 y cry4 en aislados de Bacillus thuringiensis y determinación de su actividad bioinsecticida en larvas de Aedes aegypti

• Autores: Fabián Galvis
• Localización: Interciencia: Revista de ciencia y tecnología de América, ISSN 0378-1844, Vol. 38, Nº. 2, 2013, págs. 128-131
• Idioma: español
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• Resumen
  • español

    Los insecticidas químicos pueden ser tóxicos y causar la degradación del medio ambiente; en consecuencia, el control biológico de insectos representa una alternativa con bajo impacto ecológico. Bacillus thuringiensis es una bacteria Grampositiva formadora de esporas, que produce cristales parasporales de naturaleza proteica, compuesta por delta endotoxinas que son tóxicas para un alto número de insectos y son biodegradables e inocuas para otras especies. En el presente trabajo se aislaron, a partir de muestras de suelo, 13 cepas nativas de B. thuringiensis identificadas mediante medios selectivos y el sistema BBL CRYSTAL. En la caracterización molecular utilizando cebadores específicos para la identificación de los genes cry1, cry2, cry3 y cry4; ocho aislados presentaron el gen cry3 y dos aislados el gen cry4. Estos dos últimos aislados se utilizaron en un bioensayo en larvas de Aedes aegypti para determinar su efecto toxico, mostrando que en el ensayo preliminar de toxicidad el aislado BtUDES2 presentó una letalidad del 56,67%. En la apreciación de la concentración letal del mismo aislado, se determinó una concentración letal media de 11,4333ng·ml‑1 y concentración letal total de 17,1542ng·ml‑1.

  • English

    Chemical insecticides can be toxic and cause environmental degradation. Therefore, biological control of insects represents an alternative of low ecological impact. Bacillus thuringiensis is a spore-forming Gram-positive bacterium that produces parasporal crystals of a proteic nature, formed by delta endotoxins that are toxic to a large number of insects and are biodegradable and innocuous to other species. In the present work 13 native strains of B. thuringiensis were isolated from soil samples and identified by selective methods and the BBL CRYSTAL method. In the molecular characterization utilizing specific primers for the identification of cry1, cry2, cry3 y cry4 genes, eight isolates presented the cry3 gene and two presented the cry2 gene. These two latter isolates were used in a bioassay on Aedes aegypti larvae to determine their toxic effect, showing that the preliminary toxicity essay of the BtUDES2 isolate presented a lethality of 56.67%. When determining the lethal concentration of this same isolate, an average lethal concentration of 11.4333ng·ml‑1 and a total lethal concentration of 17.1542ng·ml‑1 were found.

  • português

    Os inseticidas químicos podem ser tóxicos e causar a degradação do meio ambiente; em consequência, o controle biológico de insetos representa uma alternativa com baixo impacto ecológico. Bacillus thuringiensis é uma bactéria Gram-positiva formadora de esporas, que produz cristais parasporais de natureza proteica, composta por delta endotoxinas que são tóxicas para um alto número de insetos e são biodegradáveis e inócuas para otras espécies. No presente trabalho foram isolados, a partir de amostras de solo, 13 cepas nativas de B. thuringiensis identificadas através de meios selectivos e o sistema BBL CRYSTAL. Na caracterização molecular utilizando cebadores específicos para a identificação dos genes cry1, cry2, cry3 e cry4; oito isolados apresentaram o gen cry3 e dois isolados o gen cry4. Estes dois últimos isolados se utilizaram em um bioensaio em larvas de Aedes aegypti para determinar seu efeito tóxico, mostrando que no ensaio preliminar de toxicidade o isolado BtUDES2 apresentou 56,67% de letalidade. Na apreciação da concentração letal do mesmo isolado, se determinou uma concentração letal média de 11,4333ng·ml-1 e concentração letal total de 17,1542ng·ml-1.