Simultaneous determination of six analgesics in human plasma using solid-phase extraction and liquid chromatography

• Autores: P. Fernández, Vanesa Taboada Rodríguez, A.M. Bermejo, Antonia María Carro Díaz, R A Lorenzo
• Localización: Revista de toxicología, ISSN 0212-7113, Vol. 29, Nº. 2, 2012, págs. 95-99
• Idioma: inglés
• Títulos paralelos:
  • Determinación simultanea de seis analgésicos en plasma humano usando extracción en fase sólida y cromatografía liquida
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• Resumen
  • español

    Se desarrolló un método analítico para la determinación simultánea de paracetamol, ácido salicílico, metamizol, tramadol, ibuprofeno y diclofenaco en plasma, usando Cromatografía Líquida de Alta Resolución acoplada a un detector de array de diodos (HPLC-PDA). Se realizó una extracción en fase sólida (SPE) con cartuchos Oasis HLB®. Después de acondicionar los cartuchos con acetato de etilo, metanol y tampón fosfato pH 4, e introducir la muestra de plasma, los analitos fueron eluídos con acetato de etilo; el extracto se evaporó a sequedad, se redisolvió en fase móvil y se inyectaron 30 μL en el cromatógrafo. La separación cromatográfica fue realizada usando una columna XBridgeTM Shield RP18 (250x4.6 mm id, 5 μm tamaño partícula), y la elución se hizo con una fase móvil, compuesta por acetonitrilo, tampón fosfato pH 6,0 y agua Milli-Q, a un flujo de 1 mL/min, en modo gradiente. La respuesta del detector es lineal en el rango 0,1-20 μg/mL en plasma, con coeficientes de correlación mayores de 0.997. Los límites de detección variaron desde 7,3 a 30,1 ng/mL. Los coeficientes de variación fueron menores de 8%, y las recuperaciones oscilaron entre 90,1% para diclofenaco y 100,2% para ácido salicílico. Finalmente, se aplicó el método a 16 muestras de plasma procedentes de sujetos intoxicados con uno o más analgésicos.

  • English

    An analytical method for the simultaneous determination of paracetamol, salicylic acid, metamizol, tramadol, ibuprofen and diclofenac in plasma, using High Performance Liquid Chromatography with a photodiode array detector (HPLC-PDA) was developed. A solid-phase extraction (SPE) using Oasis HLB® cartridges was applied. After conditioning the cartridges with ethyl acetate, methanol and phosphate buffer pH 4, and introducing the plasma sample, the analytes were eluted with ethyl acetate. Then, the eluate was evaporated to dryness, reconstituted in mobile phase, and 30 μL were injected into the chromatograph. The chromatographic separation was performed on an XBridgeTM Shield RP18 column (250x4.6 mm id, 5 μm particle size), and the elution was carried out with a mobile phase consisting of acetonitrile, 5mM phosphate buffer pH 6 and Milli-Q water, at a flow of 1 mL/min, in gradient mode. The response of the detector was linear within the concentration range of 0.1-20 μg/mL in human plasma, with coefficients of correlation higher than 0.997. The limits of detection ranged from 7.3 to 30.1 ng/mL. The coefficients of variation were less than 8%, and the recoveries oscillated between 90.1% for diclofenac and 100.2% for salicylic acid. Finally, the method was applied to 16 plasma samples from subjects poisoned with one o more analgesics.