Resumen de Evolución de la fragmentación del adn en semen criopreservado de toros de lidia

Raquel Posado Ferreras, M. Hernández, Juan José García García, D.J. Bartolomé, C López-Fernández, J. Gosálvez

• español

  El objetivo de este trabajo fue analizar la curva de fragmentación del ADN espermático en semen criopreservado de 10 sementales de la raza de Lidia y observar su evolución a diferentes interva- los de tiempo preestablecidos.

  Se descongelaron las dosis a 37oC y se incubaron durante 10 días a 38,6oC, simulando la temperatura corporal de la hembra. Se analizó el porcentaje de fragmentación del ADN espermático de cada muestra a las 4, 24, 48 y 72 horas y a los 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10 días de incubación utilizando el kit Sperm-Halomax®-Bos-FF (ChromaCell SL, Madrid, Spain) para microscopía de fluorescen- cia.

  Los resultados obtenidos indican que: (i) Los niveles de fragmentación basal, así como la velo- cidad de degradación del ADN espermático a diferentes tiempos de incubación, presentan im- portantes diferencias interindividuales. (ii) A falta del estudio de un mayor número de muestras, se podría considerar que en esta raza, la integridad de la molécula de cromatina se rompe cuando el semen es incubado a una temperatura de 38,6 oC, pero aún así, puede permanecer estable durante un prolongado período de tiempo.

  Aquellos sementales con altos porcentajes de fragmentación y que acumulan daños en su ADN espermático rápidamente, tendrían escasas posi- bilidades de conseguir la fertilización. Por tanto, sería interesante conocer la curva de fragmentación del ADN de cada muestra seminal criopre- servada, porque proporcionaría información muy valiosa para establecer la mejor estrategia de reproducción asistida y esclarecer problemas de infertilidad o de falta de desarrollo embrionario cuando se aplican estas técnicas.

• English

  The objective of the present study was to analyze the curve of sperm DNA fragmentation and its development during a pre-established period of time, in cryopreserved semen of 10 bulls from Lidia's breed.

  Semen samples were thawed at 37oC and were preserved in incubation up to 10 days at 38.6oC, to emulate the corporal temperature in the female. Analysis of DNA fragmentation was assessed after 4, 24, 48, 72 hours and at 4, 5, 6, 7, 8, 9 and 10 days of incubation from each sample.

  Sperm-Halomax®-Bos-FF kit (ChromaCell SL, Madrid, Spain) was used to determine this parameter, by fluorescence microscopy. The results obtained indicated that: (i) Basal levels of fragmentation, and the velocity of sperm DNA degradation between different times, presented variation among individuals. (ii) We can consider that in these breed, the nuclear chromatin integrity gets degraded when it is incubated at a temperature of 38.6oC and can remain stable for long periods of time.

  Those bulls that present high percents of fragmentation index and a high speed of damage accumulation have a low potential to achieve fertilization. Therefore, it would be interesting to determinate the curve of DNA fragmentation in each cryopreserved sample, because it would supply information when establishing the best strategy for use to assisted reproduction techniques and it could clarify infertility or embryonic development problems for artificial insemination protocols.