Se desarrolla un protocolo para la obtención y establecimiento de suspensiones celulares de E. cinerea. La concentración de las hormonas 2,4 D Y BAP tienen un efecto significativo en la formación de callos friables de E. cinerea, obteniendo una respuesta periódica en la formación de callos friables con respecto a la concentración de las hormonas. Puede obtenerse hasta un 90% de formación de callos friables con varias combinaciones hormonales; primero, con concentraciones alrededor de 3,0 mg/L de 2,4 D Y 1,0 mg/L de BAp, y segundo, alrededor de 6,0 mg/L de 2,4 D Y1,0 mg/L de BAP. A partir de los callos anteriores, se obtienen suspensiones celulares con un activo crecimiento celular, con tiempos de duplicación entre cuatro y siete días, y alcanzando densidades celulares de 15 g células secas/L. Las suspensiones de E. cinerea ofrecen una herramienta importante para la propagación de esta especie vía embriogénesis somática, estudio de biorreactores, producción de metabolitos secundarios y procesos de biotransformación.
A protocol is developed for obtaining and establishment of E. cinerea cell suspension. The concentration of hormones 2,4 D and BAP have a significant effect in the formation of friable callus of E. cinerea, obtaining a periodic answer in the formation of friable callus with regard to hormones concentration. It can be obtained until 90% of formation of friable callus in several hormone combinations, first with concentrations around 3,0 mg/L of 2,4 D and 1,0 mg/L of BAP; and second, around 6,0 mgIL of 2,4 D and 1,0 mg/L of BAP. Using the last callus, cell suspensions are obtained with an active cellular growth, with times of duplication between 4 and 7 days and obtaining cell densities of 15 g of dry cells/L. The suspensions of E. cinerea offer an important tool for the propagation of this specie by somatic embryogenesis, bioreactors study, production of secondary metabolites and biotransformation processes.
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