Resumen de Evaluation of screening tests for antimicrobial residues in milk from individual cows treated with a combination of penicillins G and streptomycin

Violeta Díez, Juan E. Pérez, Martha Olivera Ángel, Juan G. Restrepo, David Villar A.

• español

  En Colombia, la ley (Resolucion 1382, 2013) prohibe la venta de leche que contenga residuos de cualquier medicamento antimicrobiano, aunque no se especifican pruebas oficiales ni limites de deteccion que deban cumplir.

  Actualmente, la leche que emite resultados positivos a los kits del DelvotestR y SnapR simplemente es rechazada.

  Para evitar contaminar tanques de acopio con leche de vacas tratadas, los productores se beneficiarian de tener pruebas in situ que les permitan hacer sus propios controles. Ademas, ello permitiria comprobar si los tiempos de descarte de productos comerciales cumplen con las recomendaciones de los insertos. En este estudio se evaluaron dos pruebas de deteccion rapida (DelvotestR y SNAPR especifico parar beta-lactamicos) en leche de 39 vacas con mastitis subclinica que fueron tratadas con inyecciones diarias intramusculares de una suspension comercial de 8.000.000 UI de penicilina G (75% penicilina procainica G, 25% penicilina potasica) y 8 g de sulfato de estreptomicina, durante 4 dias. Las vacas se ordenaron manualmente y recolectaron muestras de leche, cada 12 horas, por 1 dia antes y 3 despues del tiempo de retiro recomendable de 3 dias post-tratamiento. Para inactivar la accion de inhibidores naturales del crecimiento bacteriano que pueden estar presentes en leche (ej, lisozima y lactoferrina), los resultados del DelvotestR se compararon antes y despues de que las muestras de leche fuesen sometidas a calentamiento (82��C por 5 minutos).

  Cuando el DelvotestR se uso de acuerdo a las instrucciones de la compania, es decir, sin calentamiento, 7 de 39 vacas dieron positivas por . 1 dias pasado el tiempo de retiro recomendado. Sin embargo, los resultados del SnapR y DelvotestR post-calentamiento mostraron que solo 2 de las 7 vacas eran positivas, sugiriendo que 5 animales estaban dando falsos positivos. En las 312 muestras de leche analizadas se obtuvo un alto grado de concordancia (coeficiente Kappa = 0.74�}0.1) entre el SnapR y el DelvotestR post-calentamiento. En conclusion, los resultados sugieren que la eficacia del DelvotestR (post-calentamiento) es similar a la del SnapR especifico para beta-lactamicos en lo que respecta a deteccion de residuos de penicilina. Sin embargo, cuando el DelvotestR no iba precedido de calentamiento para inactivar inhibidores naturales, se produjeron demasiados falsos positivos. Los resultados tambien mostraron que en el 95% (37/39) de las vacas tratadas con este producto, la recomendacion de descarte por 3 dias cumplia con la legislacion vigente de no contener residuos.

• English

  Background: in Colombia, the law (Resolution 1382, 2013) prohibits the sale of milk that contains any antimicrobial drug residues, although no specific official screening tests and detection limits have been specified. At present, milk with positive results to both the Delvotest® and Snap® assays is simply rejected. To avoid contaminating bulk tanks with milk from individually treated cows, producers would benefit from having on-farm screening tests to conduct their own quality controls. In addition, on-site testing would allow farmers to check if the withdrawal times of commercially-available generic products are in accordance with labeled recommendations. Material and Methods:

  In this study, two commonly used rapid detection tests (Delvotest® and SNAP® specific for beta-lactams) were used on milk from 39 subclinical mastitic Holstein cows that were prescribed with daily intramuscular injections of a commercial suspension containing 8.000.000 IU of penicilin G (75% procaine penicilin G, 25% potasium penicillin) and 8 g of streptomycin sulfate, for a total of 4 days. Cows were individually milked and samples collected every 12 hours the day before, and for 3 days after the recommended withdrawal time of three days post-treatment. To inactivate the potential action of natural inhibitors of microbial growth that may be present in milk (ie., lysozyme and lactoferrin), the results of the Delvotest® were compared before and after milk samples were subjected to heat treatment (82°C for 5 minutes). Results: When the Delvotest® was used as per manufacturer's instructions (i.e., without heating), 7 of 39 cows were positive for one more day past the recommended withdrawal period. However, the results of the Snap® specific for beta-lactams and Delvotest® post-heating showed that only 2 of those 7 cows were positive, suggesting that 5 animals gave false positive results. For the 312 milk samples analyzed, a high degree of concordance was observed (Kappa coefficient=0.74±0.1) between the Snap® and Delvotest® post-heating.

  Conclusions: Considering that the streptomycin in this product is known to be eliminated faster than penicillin-G, the results suggest that the efficacy of the Delvotest® (after heat treatment) is similar to that of the Snap® beta-lactams for the detection of penicillin residues. However, when the Delvotest® was not preceded by heat treatment to inactivate potential natural inhibitors, it yielded a high number of false-positive results. The results also showed that in 95% (37/39) of the cows treated with this commercial product, the labeled instructions of a 3 day withdrawal period were adequate for compliance within the law.

• português

  Na Colombia, a lei (Resolucao 1382 de 2013) proibe a venda do leite que tenha residuos de qualquer medicamento antimicrobiano, embora nao se especifiquem testes oficiais nem limites de deteccao que devam se cumprir. Atualmente, o leite que emite resultados positivos aos Kits de DelvotestR e SnapR simplesmente e rejeitado. Para evitar contaminar os tanques de armazenamento com leite de vacas tratadas, os produtores beneficiar-se-iam de ter os testes in situ que lhes permita fazer seus proprios controles. Alem, isto permitiria comprovar se os tempos de retiro do leite ao utilizar produtos comerciais cumprem com as recomendacoes da vide bula. Neste estudo avaliaram-se dois testes de deteccao rapida (DelvotestR e SNAPR especifico parar beta-lactamicos) no leite de 39 vacas com mastite subclinica que foram tratadas com injecoes diarias intramusculares de uma suspensao comercial de 8.000.000 UI de penicilina G (75% penicilina procaina G, 25% penicilina potassica) e 8g de sulfato de estreptomicina durante quatro dias. Extraiu-se o leite das vacas com ordenha manual e se fez uma amostragem de leite (cada 12 horas) um dia antes e tres dias depois do tempo de retiro do leite, que tinha como recomendavel, na vide bula, tres dias apos final do tratamento. Para inativar a acao de inibidores naturais do crescimento bacteriano, que possam estar presentes no leite (ex. lisozima e lactoferrina), os resultados do DelvotestR compararam-se antes e depois de que as amostras de leite fossem sometidas a aquecimento (82��C durante 5 minutos). Quando o DelvotestR usou-se de acordo com as instrucoes da companhia, quer dizer, sem aquecimento, sete das 39 vacas deram positivas por . 1 dia passado o tempo de retiro recomendado.

  Embora, os resultados do SnapR e DelvotestR apos aquecimento do leite mostraram que so dois das sete vacas eram positivas, sugerindo que cinco animais estavam apresentando falsos positivos. Nas 312 amostras de leite analisadas obteve-se um alto grau de concordancia (coeficiente Kappa = 0.74�}0.1) entre o SnapR e o DelvotestR apos aquecer o leite. Em conclusao, os resultados sugerem que a eficacia do DelvotestR (apos o aquecimento do leite) e similar a do Snap ou especifico para beta-lactamicos no que respeita a deteccao de residuos de penicilina. Embora, quando o DelvotestR nao ia precedido do aquecimento do leite para inativar inibidores naturais, produziram-se muitos falsos positivos. Os resultados tambem demonstraram que o 95% (37/39) das vacas tratadas com este produto, estavam de acordo com a recomendacao de descarte por tres dias e cumpria com a legislacao vigente de nao conter residuos.