Identificación bacteriana mediante espectrometría de masas matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight. Comparación con la metodología habitual en los laboratorios de Microbiología Clínica

• Laura Ferreira ^[1] ; Silvia Vega ^[1] ; Fernando Sánchez-Juanes ^[1] ; Magdalena González ^[1] ; Ana Herrero ^[1] ; Ma Carmen Muñiz ^[1] ; José Manuel González-Buitrago ^[1] ; Juan Luis Muñoz ^[1]
  1. [1] Hospital Universitario de Salamanca

     Hospital Universitario de Salamanca

     Salamanca, España

     
• Localización: Enfermedades infecciosas y microbiología clínica, ISSN 0213-005X, Vol. 28, Nº. 8, 2010, págs. 492-497
• Idioma: español
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• Resumen

  • Introducción Los métodos de identificación bacteriana usados habitualmente en Microbiología Clínica, aunque miniaturizados y automatizados, se siguen basando en principios similares a las pruebas de identificación clásicas. Sin embargo, se van produciendo avances tecnológicos que pueden modificar radicalmente estas metodologías. En el presente estudio se determina la utilidad de la mass spectrometry (MS, �espectrometría de masas�) matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight (MALDI-TOF) para la identificación bacteriana habitual en el laboratorio de Microbiología Clínica.

    Métodos Se analizaron 294 aislamientos bacterianos aerobios y anaerobios facultativos (65 grampositivos y 229 gramnegativos) obtenidos a partir de diferentes muestras clínicas mediante metodología microbiológica habitual (Wider, Francisco Soria Melguizo, Madrid, España; Vitek-2, API Staph, API 20 Strep, API Coryne y API NH, BioMérieux, Marcy L�Etoile, Francia) y mediante un dispositivo de MS MALDI-TOF Autoflex III (Bruker Daltonics GmbH, Leipzig, Alemania). Los aislamientos de Salmonella se tipificaron con sueros específicos. Los aislamientos que no ofrecieron una fiabilidad en la identificación superior al 95% en Vitek-2 o Wider se corroboraron mediante API. Los aislamientos en los que los sistemas API no ofrecieron un perfil fiable se descartaron. La identificación mediante MS MALDI-TOF se puntúa automáticamente por el software del sistema de 0�3 en función de su fiabilidad. Los aislamientos con puntuaciones inferiores a 1,5 se consideraron no fiables. La correlación entre ambas identificaciones se clasificó como correlación en la especie, el género o la ausencia de correlación.

    Resultados La correlación en la especie en los grampositivos estudiados fue del 100%. La correlación en los gramnegativos fue del 87,7% en la especie y del 97,7% en el género. Solo hubo ausencia de correlación en un 2,2% de los aislamientos. Las identificaciones fallidas se dieron en los géneros Raoultella y Acinetobacter, en Stenotrophomonas maltophilia y en Francisella tularensis.

    Conclusión La identificación de aislamientos bacterianos clínicos mediante MS MALDI-TOF muestra una excelente correlación con la identificación mediante la metodología convencional. A ello hay que añadir que se trata de una tecnología que permite la identificación de los microorganismos a partir de colonias crecidas en placa de cultivo en apenas unos minutos con una metodología extremadamente simple y sin apenas consumibles, aunque los costes de amortización de los equipos pueden ser considerables.